pcr出科自我鉴定

pcr出科自我鉴定（共7篇）

pcr出科自我鉴定 篇1

自我鉴定是一个人在某个阶段的学习和工作生活等表现的一个自我总结，自我鉴定可以使我们更加明确目标，因此好好准备一份自我鉴定吧。自我鉴定怎么写才不会流于形式呢？下面是小编为大家收集的出科自我鉴定范文，欢迎阅读，希望大家能够喜欢。

出科自我鉴定范文1

不知不觉咱们已在产科呆了一个月了，在这一个月来，使我充足扎实的学到了不少专业知识。妇产科不同于其余科室，它的专业功底是很雄厚的，只有真正的去努力学会吃透，才算得上是不断改进。

在带教王老师的指点下，每个礼拜我们都取得了理论的灌注，如：专科的知识要点，注意事项，护理操作。从而使我更深刻地舆论接洽到实践中去，比喻说，给婴儿洗澡时应留神什么，虽然还轮不到我们为婴儿洗澡，但我可从中学习，此外在产房的时候，为病人消毒皮肤，之中我有不足的处所，但我更乐意吸取教训，努力更正，争夺做好。

通过妇产科实习，坚固妇产科的实践常识，熟习妊娠、分娩、产后的畸形进程及其护理，异样过程及患病妇女的护理、打算生养跟妇女保健领导内容等，同时要懂得海内外新技巧、新疗法的进展情形，如互动式亲情沐浴、导乐分娩、婴儿抚触、婴儿游泳等以家庭为核心的护理技术，发展护理科研，撰写论文，培育学生的综合素质，进步学生的实际技巧。

产科的实习工作固然忙，但忙有所得。不论任何科室，我都会尽力踊跃地去做好！

出科自我鉴定范文2

短短的1个月儿科实习即将结束，回想这期间的点点滴滴，似乎在尝试无味瓶里的味道一样。临床的实习是对理论学习阶段的巩固与加强，也是对临床技能操作的培养和锻炼。我们倍偿珍惜这段时间，珍惜每一天的锻炼和自我提高的机会，珍惜与老师们这段难得的师徒之情。

儿科是一个独特的科室，面对的是个个脆弱的小生命。这更让我意识到医生不仅要医术高，更要懂得如何和他们沟通。对待患儿和蔼可亲，态度良好，虽然有些时候会遇到很多焦虑的患儿家属口不择言，而我们医护人员能做的就是宽容。我们可以体会他们的心情，孩子生病，谁的心里都会着急万分的，说一些伤人的话我们是可以理解的。我们能做的就是继续为患者服务，力争做到最好。每天接触很多患儿和他们亲人的时候，我明白了人生最大的财富不是金钱而是生命和健康，而我们的职责正是捍卫健康的生命。

在实习期间我遵纪守法，遵守医院及儿科室的各项规章制度，尊敬师长，团结同学，严格要求自己，努力做到了不迟到、不早退、不无故旷工及擅自离开工作岗位。对待病人和蔼可亲，态度良好，努力将所学理论知识和基本技能用于实践，在此过程中我不断总结学习方法和临床经验，尽力提高独立思考、独立解决问题、独立工作的能力，培养自己全心全意为人民服务的崇高思想和良好的职业道德，经过1个月的实践我基本掌握了病程记录、会诊记录、出院记录等医疗文件的书写；掌握了临床儿科的特点及儿科常见、多发病人的诊治；掌握了常见化验的正常值和临床意义及和各类危、重、急病人的初步处理。

今后，我会继续以“热情、求实、尽职”的作风，持着主动求学的学习态度，积极各科室的老师学习，秉着“健康所系性命相托”的信念，孜孜不倦地吸收医学知识为日后的学习、工作打下坚实的基矗不断追求，不断学习，不断创新，努力发展自我，完善自我，超越自我是我崇尚的理念。儿科护士实习自我鉴定：熟悉疾病的病因及临床特点，了解其诊疗常规，常见急症的处理方法。

出科自我鉴定范文3

很荣幸有机会参加中医科的规培学习，虽然一个月的时间转眼即逝，但我还是见识到中医的特点与特色。

西医的诊治多借助于先进的技术及精密的仪器。而中医的优势恰恰是西医薄弱的方面，中医的接诊者是由望闻问切来辨证施治，治病多是通过对病人本身反馈的信息来加以总结，辩证论治。所以西医无检查手段，就成了巧妇难为无米之炊，而中医则靠患者的身体反馈信息结合经验就能得出结果，有其独到的特点。而且中医强调治疗未病之病，强调预防的重要性，中药的治病之本、调理、滋补功能的理念很值得借鉴。除了中医思想，中医科的治疗手段也是独具特色，科室用的`较多的有中药、针灸、拔罐，偶有灸法、药浴、中药热奄包治疗等，虽然不是很了解，但是确实有其独到的治疗效果。像常用到的足三里穴位封闭及针灸治疗，确实给患者带来了明显的治疗效果。

我来中医科的时间有限，没有足够的时间好好掌握中医的治疗手段，但是我己经见识到了中医的特色及中医在医学治疗领域的不可或缺地位。也很感谢刘老师的指导，让我在中医科不仅学习了中医的诸多治疗，更让我认识到医者仁心，医生面对的有来自患者、家属及自身三方面的因素，必须以自己的专业知识及人文关怀，来减轻患者的痛苦，来安抚焦灼的家属，处理好医患关系，把潜在矛盾消灭在萌芽阶段。

出科自我鉴定范文4

在泌尿外科已经工作满一年了，从病房到特检室，再回到病房，整整一年，成长了，学习了，收获了。记得去年的这个时候，自己刚来到这个科室，一切都是陌生的，会做和能做的也都是最最基本的事情，而现在，我已经能独立上治疗班，能自己包组了。

起初，还没能适应新环境时，一些小事也做不好，其它的事情也不会做，有些不知所措，慢慢的，开始进入状态，很多新的事都努力去学去做，就算做错了也不气馁，总结了教训后再做，一段时间后明显觉得自己有所进步了，渐渐地开始学习上治疗班，刚开始上的时候，还不是很熟悉，还需要老师在一旁提醒、指点，上过几次后，就开始掌握了，渐渐地能独立上治疗班了，一切都在向前进步。

偶然的机会去到了特检室工作，是一个完全不一样的地方，学习到了新的知识和技能，学到了别人学不到的东西，又有了新的收获。再回到病房工作时，一开始没能调整过来，所以工作上有些乱，理清了思路、调整好状态后，一切又变得有条理了。之后开始独立包组，一开始做的不是很好，慢慢的学习后，有些进步了，现在基本上可以独立担任了。我还上了小夜班，小夜班主要就是协助中夜班护士一起工作，为患者做好术前准备，在上小夜班的同时，我还对中班和夜班的工作有了初步的了解，也为自己今后的工作做了准备。

从什么都不会到现在，自己学习到了泌尿外科的相关知识，学习了如何如患者进行沟通，从中知道了，其实自己要学的东西还很多，特别是与患者沟通方面，我觉得自己做的还不是很好，相信在以后的工作中，还会再继续去学习。在各位老师的指导下我熟练掌握了泌尿外科各项规章制度，严格遵守泌尿外科要求的无菌操作原则，也基本掌握了一些常见病的护理以及一些基本操作，学会了如何对患者进行术前术后的护理，这些都是我这一年来所收获的，在前不久，我还获得了“白衣天使展风采”的操作比赛二等奖，这是我工作以来第一次取得的成果，我很开心，当然，要继续努力，不断提高自我，争取能在以后的工作中，取得更优越的成绩。

在这一年的工作中，除了自己的努力外，当然也少不了老师们对我的指导，因为你们的耐心，我学习到了许多以前没学过的知识；因为你们的鼓励，就算我跌倒了也不怕，站起来继续向前进；因为你们的肯定，我对自己的工作越来越有自信。感谢老师们对我所付出的一切，在以后的工作中，我会更加努力，不断前进，愿自己能够更上一层楼。

出科自我鉴定范文5

妇产科实习已告一段落，由于该科室实行跟班制，每星期一班种，加上实习生还没有考取护士资格证书，一般不能进行文件书写，这使我有了更多的机会接触临床，了解患者，实践自我。

在妇科门诊叫号；在产前检查室推算孕期，测量血压，监测胎心；在手术室阴道冲洗及术前准备，一切都为我在妇产科的实习开启了一扇光明之门。

产班主要是护理产妇的，我不仅要进行产后切口的红外线照射及中药敷贴治疗，还得推着一个笨重的按摩仪进行乳房及子宫按摩，以促进乳汁分泌和子宫恢复。当然，每天三次的会阴消毒也是必不可少的。这些治疗花费了我大部分时间，使我几乎无暇顾及其他，只能在治疗之余做些短时间的操作，比如接盐水，听胎心等。

相对而言，妇班的工作就比较杂了，主要有吸氧，红外线照射切口，冲洗膀胱，更换引流袋。其实产班、妇班的工作没有绝对的界限，都是互帮互助的，比如输液，测体温、血压、血糖等，都是谁有空就谁去做。

主班主要在产房工作，照顾待产妇，协助生产及母婴健康宣教。早上除了协助老师进行婴儿洗澡，测量黄疸值，打疫苗及抽血、测血糖等，还有婴儿抚触，下午便是铺婴儿床和打包器械。虽然我还未为人母，但这里所学的一切对我今后如何扮好母亲角色受益匪浅。

只有扎实投入实习，好好体会才能慢慢积累经验。本人在妇产科实习期间，遵守医院的各项规章制度，无迟到、早退现象，尊敬老师，工作积极主动，努力将所学理论知识和基本技能应用于实践。在老师的指导下，我基本掌握了妇产科一些常见病的护理以及一些基本操作，使我从一个实习生逐步向护士过渡，从而让我认识到临床工作的特殊性与必要性。

感谢老师们的教导让我圆满而愉快的结束了在妇产科的实习。

出科自我鉴定范文6

光阴似箭，一晃眼，走进xxx市一医院，来到骨科成为一名救死扶伤的护士已经半年了。自毕业以来，我一向以严谨的态度和用心的热情投身于学习和工作中，有成功的喜悦，也有失败的辛酸。接触到临床后，发现，自己不仅仅要有扎实的理论，熟练的临床操作，良好的职业道德，还务必培养自己的耐心和爱心等等。六个月的使用期即将结束，但我对自己的要求会更加严格，特自我鉴定如下：

在思想上，有很强的上进心，勇于批评与自我批评，树立了正确的人生观和价值观。能严格遵守医院的各项规章制度的，用心参加医院和科室组织的各项活动并能尊敬领导，团结同事。

在学习上，严格要求自己，凭着自己对成为一名优秀白衣天使的目标和知识的强烈追求，刻苦钻研，勤奋好学，态度端正，目标明确，基本上掌握了一些专业知识和操作技能，熟练的掌握了专科知识和各项专科护理操作，作到了理论联系实际。除了专业知识的学习外，还注意各方面知识的扩展，广泛的涉猎其他学科的知识，从而提高了自身的思想文化素质。

在工作上，我用心配合上级领导和同事，正确执行医嘱及各项护理技术操作规程，做好基础护理，严格执行无菌操作和三查七对制度。发现问题，及时上报，及时解决。在工作中能理论联系实际，遇到不懂的问题能及时向护士长及年资深的老师请教，努力提高自身的业务水平。对待患者能礼貌礼貌的服务，做到举止礼貌、态度和蔼，急病人所急，想病人所想。用心与患者沟通，及时了解他们的心理动态，以便让患者理解更好的治疗，并做好健康宣教。

在生活上，养成了良好的生活习惯，生活充实而有条理，以严谨而用心向上的生活态度打理好自己的每一天。为人热情大方，诚实守信，乐于助人，拥有自己的尺度均衡的处事原则，能与同事们和睦相处，用心参加各项课外活动，从而不断的丰富自己的工作阅历和生活。

把有限的生命投入到无限的医护工作中。在今后的工作中我会更加不断努力地学习上进，不断提高自身的专业技术水平，从而使自己的理论知识及操作技能更上一个台阶，以便能更好的服务于患者。争取做一名优秀的护理人员，以无愧于白衣天使的光荣称号！

出科自我鉴定范文7

本人在校期间，热爱祖国，拥护中国共产党，坚持党的四项基本原则，坚决拥护中国共产党及其方针、路线和政策，政治思想觉悟高，积极参加各项思想政治学习活动，并参加了学院党委举办的党员培养发展的对象。严格遵守国家法规及学院各项规章制度。在“立志立德、求真求精”八字校风的鞭策下，我努力学习，刻苦钻研、勇于进取、努力将自己培养成为具有较高综合素质的医学毕业生。我尊敬老师，团结同学，以“热情、求实、尽职”的作风，积极完成学校和年级的各项任务，在临床实习期间，持着主动求学的学习态度，积极向临床上级医生学习，秉着“健康所系性命相托”的信念，孜孜不倦地吸收医学知识为日后的学习、工作打下坚实的基础。

不断追求，不断学习，不断创新，努力发展自我，完善自我，超越自我是我崇尚的理念。尽力做好每一件事是我个人的基本原则。

在内、外、妇、儿、皮肤、康复科及心电图室放射科五官科均实习。得到各科老师及科室主任的好评实习期间认真学习，理论结合实际，作为助手上过多次小型手术如阑尾手术、包皮环切术、粉瘤切除术、剖宫产术、骨科各类骨折开放整复及手法复位、断指再植手术、截肢手术等，并观摩过多次股骨头置换术、尿道悬吊术、子宫切除术等。并掌握了放射科及皮肤科的基本知识等，基本能独立处理常见病多发病的诊治，善于与病人沟通。

我热爱医学事业，并立志献身于医学事业！我牢记着医学生的誓词：我自愿献身医学，热爱祖国，忠于人民，恪守医德，尊师守纪，刻苦钻研，孜孜不倦，精益求精，全面发展。我决心竭尽全力除人类之病痛，助健康之完美，维护医术的圣洁和荣誉，救死扶伤，不辞艰辛，执着追求，为祖国医药卫生事业的发展和人类身心健康奋斗终生。

“百尺竿头，更进一步”，我将在以后的工作和学习中更加努力，不断充实自我、完善自我，做一名二十一世纪的好医生！

出科自我鉴定范文8

本人在供应室实习期间，遵守科室的各项规章制度，尊重老师，在老师的辛勤教导下，本人基本掌握了供应室各项工作流程及要点，学会了操作各种仪器设备。能够独立完成各种物品，器械，包裹的清洁、消毒和无菌处理，对各科送来及取回的包裹认真登记，未发生任何差错。实习期间，本人工作积极主动，仔细认真，圆满完成了实习任务。出科小结不用写太多，主要是写自己在科室学到了什么就行了。

刚刚走上实习岗位，第三站进入供应室；其实是幸福快乐的！

刚刚走进供应室的时候，本人就好象一个乳嗅未干的孩子，什么都不懂。对于一切的事物也都感觉到陌生和茫然。做起事来也显得很拘束，好象生怕会做错事一样！后来在老师们的热情还有细心的教导下，本人渐渐找到方向；对于这个新环境也一天天熟悉起来。更摸索出一个道理——每做一件事时，多问问。这样不仅能对你正在做的这件事情多一分的了解还能多长一些知识。也就不仅仅只是很盲目的去做事！这样一天天的累计就会明白很多以前所不知道的东西。

在供应室中，本人了解到，供应室是整个医院整体工作的重要部分，担负着全院提供充足，完好；规格齐全；品质保障的消毒灭菌任务。它相当于一个部队的后勤部，一部电影的幕后制作。而奔跑于医疗工作第一线的医护人员之所以能够放心使用医疗器械为病人手术及护理，也都要归功于供应室中的工作人员辛勤的劳动成果！在供应室里，本人掌握了它至关重要的三大划分区域。即：污染区——清洁区——无菌区；也加重了本人脑海中对于无菌消毒的概念。

以后当本人走上临床实习时，本人想每当本人看见一个个无菌包和一件件医疗器械的时候；在本人的脑海中应该会下意识就会明白那一个个都是什么包、什么器械又有着怎么样的用途。然后会很自然的联想到它们都是经过供应室回收、分类、清洗消毒、烘干润滑上油、包装灭菌、存储这样一个过程之后才分发到各个科室的。这一过程也许听起来都是些很小很简单的事情，但是它的每个细节都是很细微很重要的。而这些也都是本人在供应室的收获！

pcr出科自我鉴定 篇2

试验依据Y染色体上的特异序列设计雄性特异性引物,选取Beta基因设计内标引物以避免扩增失败而造成误判。试验采用多重PCR技术对采集的样品进行性别鉴定,旨在建立一套简单、快速性别鉴定方法,现报道如下。

1 材料和方法

1. 1 试剂及仪器

TKM缓冲液 ( 10 mmol / L Tris - HCl,p H值为7. 6,10 mmol / L KCl,2 mmol / L EDTA,4 mmol / LMg Cl2) 、10% SDS、饱和Na Cl溶液、无水乙醇、70% 乙醇、TE缓冲液 ( 10 mmol/L Tris - HCl p H值为8,0. 1 mmol / L EDTA) ; 琼脂糖凝胶、TAE电泳缓冲液( 40 mmol/L Tris - acetate,1 mmol/L EDTA) 、离心机、水浴锅等。

1. 2 样品的获得

牛耳部样品来源于大庆养牛场( 取40个样本,20♀,20♂,样品只标样号,不标性别 ) 。

1. 3 基因组 DNA 的提取

分别从获取的样品剪取少量组织( 约1 mg) ,置于1. 5 mL的EP管中并剪碎,加入100μL TKM缓冲液。用200μL移液器将剪碎的组织充分分散后。再加入400μL TKM和37. 5μL 10% SDS,旋涡混匀。55℃孵育5 min。加200μL饱和Na Cl,旋涡混匀。12 000 r / min离心5 min。取上清液( 约500μL ) 加入新1. 5 mL EP管中 ( 预先加入900μL100% 乙醇) ,颠覆数次。12 000 r/min离心5 min。弃去上清液,加500μL 70% 乙醇轻轻转动后,吸去乙醇,倒置于滤纸上,置3 min,干燥。加100μL TE缓冲液,55℃置10 min,备用[1]。

1. 4 引物的设计

根据牛β基因序列和Y基因序列分别设计引物β - 1,2和Y - 1,2引物序列如下: Beefβ - 1,5' GGGACTCCAAGCTTCAATCA - 3'; Beefβ - 2,5' TGGAGGAGGAAGAAAAGAAC - 3'; Beef Y - 1,5' TGGGACTGGTGACAATTGTC - 3'; Beef Y - 2,5' GAGTACAGGTGTGCAGCTCT - 3'。

1. 5 多重 PCR 性别鉴定

50μL反应体系: 1μL DNA模板,2对引物各1μL,Mg Cl23μL,d NTP 4μL,10×PCR Buffer( Mg2 +free ) ,Taq酶0. 25μL,灭菌双蒸水补加至50μL。95℃预变性5 min; 95℃变性30 s,56℃退火30 s,72℃延伸30 s,30个循环; 72℃延伸5 min。

1. 6 电泳

取PCR产物进行凝胶电泳检测,上样量为1μL,1. 5% 琼脂糖凝胶含0. 2μg / mL EB,1×TAE电泳缓冲液,100 V电压下,电泳20 min。用凝胶成像仪统检测、拍照结果。

2 结果与分析

2. 1 结果

多重PCR性别鉴定的结果见图1。

用所设计的β和SRY引物对9样品与已知性别的样品进行鉴定,雄性DNA样品可扩增300 bp的β基因和429 bp的SRY基因片段,而雌性DNA样品只能扩增300 bp的β基因片段。从PCR结果可知,4,6,8,9,11是雄性样品,5,7,10,12是雌性样品。另外共对已知性别的40个样品进行了PCR鉴定,正确率为100% 。验证了这2对引物在对牛的快速性别鉴定上是及其有效的。

2. 2 分析

从图1结果来看,选定的2对引物在所选用PCR条件下,在300 bp和429 bp处没有干扰带的出现,因此无背景干扰; 如果只用1对SRY引物进行鉴定,在一些样本中基因组DNA提取过程中可能会丢失,所以在单独使用一对特异性引物( SRY) 进行PCR反应时没有显示条带的不一定说明样品为雌性基因组DNA。而在使用2对引物同时进行PCR反应时,发现内参比带具有重要内部控制功能,内参比带可以确保基因组DNA是否有效提取。因而,选择Beta基因为内参比基因( 雌雄共有) ,因此有β和SRY 2条带的为雄性,仅有β1条带的为雌性,倘若1条带都没有说明基因组DNA提取过程中丢失,或没有取到目的细胞。

3 讨论

PCR能使极少的目的基因大量扩增,所以在实验操作过程中要避免交叉污染。多重PCR要求在同一反应体系中进行多个位点的特异性扩增,因而,引物间的配对、引物间的竞争性扩增等均影响多重PCR的扩增效果,但如能调整反应的循环参数( 包括退火温度、退火及延伸时间等) 、PCR缓冲液成分、d NTP用量、引物的量及模板的量等,选择适宜的反应体系和反应条件,可极大地提高多重PCR扩增效果[2]。此外,DNA的抽提质量也是影响多重PCR扩增效率的一个重要方面,如DNA抽提不干净或降解都将影响PCR扩增效果。

摘要：为了建立一套简单、快速鉴定性别的方法,试验根据牛的Beta基因及SRY基因,设计2对引物(β-1,2和SRY-1,2),对牛96个牛肉DNA样本进行PCR性别鉴定。结果表明:雄性样品扩增出了300 bp和429 bp 2条片段,而雌性样品只能扩增出300 bp 1条片段。40个牛血液DNA样本鉴定结果与实际性别对比,雄性、雌性准确率均为100%。

关键词：多重PCR,快速鉴定,性别,基因,牛

参考文献

[1]JEAN F L,BRIAN O.BENOIT G A,et al.Quick sex determination of mouse fetuses[J].J Neurosci Meth,2000,95(2):127-132.

pcr出科自我鉴定 篇3

关键词 CHD ；PCR ；鸡 ；性别鉴定

中图分类号 S836.2

鸡的性别与其价值关系密切，对鸡进行早期性别鉴定具有重要的经济意义。生产上常用翻肛鉴别法和伴性性状鉴别法。翻肛鉴别法必须在出壳后24 h（最好12 h）内进行，而且即使是经验丰富的翻肛员至少也有1.4 %的错误率，且会对雏鸡造成伤害[1]。而伴性性状鉴别法依赖于专门品种或品系之间的杂交，不能通用。随着分子生物学等学科研究的深入，鸟类的性别鉴定已经开发出了PCR方法，可以将鉴定的准确率提高至100 %，而且不受年龄限制，可以实现胚胎期的性别鉴定。染色体螺旋蛋白基因（chromobox-helicase-DNA binding gene，CHD）存在于鸟类性染色体Z和W上，Z染色体上的CHD表示为CHD-Z，W染色体上的CHD表示为CHD-W；因为雌鸟的性染色体组成是ZW型，雄鸟的性染色体组成为ZZ型，所以雌鸟中既含有CHD-Z又含有CHD-W，雄鸟中只有CHD-Z；CHD-Z和CHD-W外显子相似，内含子长度不同[2-4]。通过在CHD基因内含子两侧的保守区设计引物，对样本基因组进行PCR扩增，以CHD-Z和CHD-W为模板扩增出的片段长度不同，公鸡只能扩增出1个片段，而母鸡可以扩增出大小不同的2个片段，根据PCR产物的数量和片段大小可以推测个体的染色体组成，从而判断性别。

1 材料与方法

1.1 材料

刚出壳的海南儋州本地鸡，翼下静脉刺血，收集于已加入抗凝剂的离心管中，-20 ℃保存备用。然后解剖记录每只鸡的性别。选取其中的2只公鸡和2只母鸡的血样进行基因组DNA提取，PCR扩增及电泳检测。

试剂：血液基因组提取试剂盒购自天根生化科技（北京）有限公司，PCR试剂采用全式金super Mix，PCR引物交由上海生物工程技术有限公司合成。

1.2 方法

1.2.1 PCR引物

选用2550F/2718R[5]和SF/SR[6]两对引物分别对4只鸡样本进行PCR性别鉴定。引物序列为：2550F：5′-GTTACTGATTCGTCTACGAGA-3′，2718R：5′-ATTGAAATGATCCAGTGCTTG-3′；SF：5′-AGTGCATTGCAGAAGCAATATT-3′，SR：5′-GCCTCCTGTTTATTATAGAATTCAT-3′。

1.2.2 PCR体系和程序

25 μL体系：模板1 μL，上、下游引物各1 μL，PCR Mix 12.5 μL，ddH2O 9.5 μL。反应程序：94.0 ℃ 5 min；94.0 ℃ 30 s，54.0 ℃ 30 s，72.0 ℃ 40 s，35个循环；72.0 ℃ 7 min，4 ℃保存。

1.2.3 电泳检测

吸取10 μL PCR扩增产物用1.5 %的琼脂糖凝胶电泳检测，在紫外检测仪下观察结果，并拍照记录。

2 结果与分析

2.1 基因组DNA

将提取的鸡基因组DNA用1.0 %的琼脂糖凝胶进行电泳检测。由图1可知，鸡基因组DNA电泳图呈现致密亮带，表明所提DNA质量良好，可用于PCR扩增。

2.2 PCR扩增结果

利用2550F/2718R和SF/SR两对引物分别对鸡基因组DNA进行PCR扩增结果见图2。引物对2550F/2718R PCR扩增产物为：公鸡有1条带，片段长约600 bp，母鸡有2条带，1条片段长度约600 bp，和公鸡相当，另一条片段长450 bp。引物对SF/SR PCR扩增产物为：公鸡有1条约500 bp的条带，母鸡有2条带，1条长度同公鸡相当，约500 bp，另一条约350 bp。PCR性别鉴定结果与已知性别完全吻合，条带清晰明亮，无杂带，证明两对引物都可以特异高效的扩增鸡Z和W染色体的CHD基因片段，PCR体系配比和PCR所设条件适宜，所采用的方法可以准确鉴定鸡的性别。

3 讨论与结论

3.1 利用CHD基因性别鉴定

CHD基因存在许多鸟类中，其进化速率慢，序列非常保守，已成为非平胸类鸟类性别鉴定的分子标记[7]。Griffiths等[2，8]利用CHD基因设计引物P2/P3和P2/P8对约30种鸟类性别进行了准确鉴定；盖玉林等[9]利用CHD基因和引物P2/P8准确鉴定了画眉和红嘴相思鸟的性别；陈蓉等[10]利用CHD基因和引物2550F/2718R对美洲红鹮和火烈鸟的性别进行了准确鉴定；张莉等[11]和吕夕超等[12]分别利用该基因对鸽子和信鸽进行了性别鉴定。

3.2 性别的判定

利用CHD基因进行性别鉴定，以CHD-Z为模板扩增出的条带称为Z带，以CHD-W为模板扩增出的条带为W带。理论上扩增出1条带说明基因组只含有Z染色体，为公鸡，扩增出2条带说明基因组含有Z和W染色体，为母鸡，根据条带的数目即可判断性别。笔者和刘宏祥等[6]研究结果均发现：母鸡样本中Z带和W带的合成存在竞争关系，W带因为较短合成效率较高，更容易扩增出来，在模板质量不好或者反应条件不适宜时，可能出现母鸡基因组扩增不出Z带的情况，所以母鸡样本有时也会出现1条带的情况。在实际操作时，除了通过条带数目还应该观察条带大小进行性别判定，如果PCR产物只有W带，也可判定为母鸡。

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3.3 PCR法性别鉴定展望

鸡作为主要经济动物在畜牧生产中一直占有重要地位，为获得不同的产品要对家鸡性别做严格的选择，对鸡胚或雏鸡进行性别鉴定并分流可大大节省人力、物力，降低生产成本。除鸡以外，家鸽、信鸽、大部分鸟类均可以利用该基因进行性别鉴定。PCR方法因为直接检测动物的分子本质，故性别判断的准确率高，且对动物的伤害小，不受发育时期的限制，优势明显。特别对于存在性反转，或者性别分化不明显的个体，作为判定的标准更为适宜。随着实验技术的不断改进，PCR鉴定方法越来越简单、经济、快捷，必将在生产实践中发挥更大的作用。

鸡的性别可以利用CHD基因及引物对2550F/2718R或SR/SF进行准确鉴定。引物对2550F/2718R判断标准为：PCR产物有1条约600 bp条带者为公鸡，有600 bp和450 bp两条带者为母鸡，如果只出现450 bp条带，也可以判定为母鸡。引物对SF/SR判断标准为：PCR产物有1条约500 bp的条带者为公鸡，有约500 bp和350 bp两条带者为母鸡，如果只出现1条约350 bp条带也可以判定为母鸡。两对引物扩增效率高且特异，所设条件适宜，本试验方法可以准确的鉴定鸡早期性别，在生产和科研上有广阔的应用前景。

参考文献

[1] 王晓峰. 鸡胚性别鉴别——家禽科学研究的新视点[J].中国家禽，2003，25（14）：23-33.

[2] Griffiths R， Tiwari B. Sex of the last wild Spix′s macaw[J]. Nature， 1995， 375（6531）：454.

[3] Griffiths R， Korn R M. A CHD gene is Z chromosome linked in the chicken Gallus domesticus[J].Gene， 1997， 197（1/2）：225-229.

[4] Fridolfsson， Daan S， Dijkstra C. Sex identification in birds using two CHD genes[J]. Proc Biol Sci， 1996， 263（1 374）：1 251-1 256.

[5] Anna K F， Hans E. A simple and universal method for molecular sexing of non-ratite birds[J]. Avian Biology， 1999， 30：116-121.

[6] 刘宏祥，姬改革，胡 艳，等. 基于性染色体CHD基因序列差异鉴定鸡的性别[J]. 中国家禽，2013，11（22）：9-10.

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[12] 吕夕超，叶 超，纪丝保，等. 通过CHD基因鉴定信鸽性别[J]. 中国畜牧杂志，2015，51（9）：12-15.

妇科出科自我鉴定 篇4

在丰富多彩的学生活中，为了扩知识面和培养自己的业余爱好;积极参加校内外的实践活动，重视团队合作精神;作为系学生会干部的我，有较强的组织、宣传、管理和应变能力;有高度的责任心和良好的人际关系。在出色地完成上级交予的任务外，还在校内组织和开展一些有意义的活动中，能有力地组织同学及调动同学们的积极性;从中也锻炼和提高了自己的组织和领导能力。表现出较强的与人密切合作的能力和良好的环境适应能力;并且深受同学们和老师以及领导的认可。

在思想品德上，本人有良好道德修养，并有坚定的方向。我热爱祖国，热爱人民，坚决拥护制度，遵纪守法，爱护公共财产，团结同学，乐于助人。并以务实求真的精神热心参与学校的公益宣传和爱国主义活动。

我的学习成绩不是非常好，但我却在学习的过程中收获了很多。首先是我端正了学习态度。在我考进学时，脑子里想的是好好放松从重压下解放出来的自己，然而很快我就明白了，学仍需努力认真的学习。看到周围的同学们拼命的学习，我也打消了初衷，开始学的学习旅程。其次是极程度的提高了自己的自学能力。由于学的授课已不再像高中时填鸭式那样，而是一节课讲述很多知识，只靠课堂上听讲是完全不够的。这就要求在课下练习巩固课堂上所学的知识，须自己钻研并时常去图书馆查一些相关资料。

日积月累，自学能力得到了提高。再有就是懂得了运用学习方法同时注重立思考。要想学好只埋头苦学是不行的，要学会“方法”，做事情的方法。古话说的好，授人以鱼不如授人以渔，我来这里的目的就是要学会“渔”，但说起来容易做起来难，我换了好多种方法，做什么都勤于思考，遇有不懂的地方能勤于请教。在学习时，以“立思考”作为自己的座右铭，时刻不忘警戒。

随着学习的进步，我不止是学到了公共基础学科知识和很多专业知识，我的心智也有了一个质的飞跃，能较快速的掌握一种新的技术知识，我认为这对于将来很重要。在学习知识这段时间里，我更与老师建立了浓厚的师生情谊。老师们的谆谆教导，使我体会了学习的乐趣。我与身边许多同学，也建立了良好的学习关系，互互助，克服难关。现在我已经四，正在做毕业设计，更锻炼了自我的动手和分析问题能力，受益匪浅。

出科自我鉴定（精选7篇） 篇5

很荣幸有机会参加中医科的规培学习，虽然一个月的时间转眼即逝，但我还是见识到中医的特点与特色。

西医的诊治多借助于先进的技术及精密的仪器。而中医的优势恰恰是西医薄弱的方面，中医的接诊者是由望闻问切来辨证施治，治病多是通过对病人本身反馈的信息来加以总结，辩证论治。所以西医无检查手段，就成了巧妇难为无米之炊，而中医则靠患者的身体反馈信息结合经验就能得出结果，有其独到的特点。而且中医强调治疗未病之病，强调预防的重要性，中药的治病之本、调理、滋补功能的理念很值得借鉴。除了中医思想，中医科的治疗手段也是独具特色，科室用的较多的有中药、针灸、拔罐，偶有灸法、药浴、中药热奄包治疗等，虽然不是很了解，但是确实有其独到的治疗效果。像常用到的足三里穴位封闭及针灸治疗，确实给患者带来了明显的治疗效果。

我来中医科的时间有限，没有足够的时间好好掌握中医的治疗手段，但是我己经见识到了中医的特色及中医在医学治疗领域的不可或缺地位。也很感谢刘老师的指导，让我在中医科不仅学习了中医的诸多治疗，更让我认识到医者仁心，医生面对的有来自患者、家属及自身三方面的因素，必须以自己的专业知识及人文关怀，来减轻患者的痛苦，来安抚焦灼的家属，处理好医患关系，把潜在矛盾消灭在萌芽阶段。

篇2：出科自我鉴定

光阴似箭，一晃眼，走进xxx市一医院，来到骨科成为一名救死扶伤的护士已经半年了。自毕业以来，我一向以严谨的态度和用心的`热情投身于学习和工作中，有成功的喜悦，也有失败的辛酸。接触到临床后，发现，自己不仅仅要有扎实的理论，熟练的临床操作，良好的职业道德，还务必培养自己的耐心和爱心等等。六个月的使用期即将结束，但我对自己的要求会更加严格，特自我鉴定如下：

在思想上，有很强的上进心，勇于批评与自我批评，树立了正确的人生观和价值观。能严格遵守医院的各项规章制度的，用心参加医院和科室组织的各项活动并能尊敬领导，团结同事。

在学习上，严格要求自己，凭着自己对成为一名优秀白衣天使的目标和知识的强烈追求，刻苦钻研，勤奋好学，态度端正，目标明确，基本上掌握了一些专业知识和操作技能，熟练的掌握了专科知识和各项专科护理操作，作到了理论联系实际。除了专业知识的学习外，还注意各方面知识的扩展，广泛的涉猎其他学科的知识，从而提高了自身的思想文化素质。

在工作上，我用心配合上级领导和同事，正确执行医嘱及各项护理技术操作规程，做好基础护理，严格执行无菌操作和三查七对制度。发现问题，及时上报，及时解决。在工作中能理论联系实际，遇到不懂的问题能及时向护士长及年资深的老师请教，努力提高自身的业务水平。对待患者能礼貌礼貌的服务，做到举止礼貌、态度和蔼，急病人所急，想病人所想。用心与患者沟通，及时了解他们的心理动态，以便让患者理解更好的治疗，并做好健康宣教。

在生活上，养成了良好的生活习惯，生活充实而有条理，以严谨而用心向上的生活态度打理好自己的每一天。为人热情大方，诚实守信，乐于助人，拥有自己的尺度均衡的处事原则，能与同事们和睦相处，用心参加各项课外活动，从而不断的丰富自己的工作阅历和生活。

把有限的生命投入到无限的医护工作中。在今后的工作中我会更加不断努力地学习上进，不断提高自身的专业技术水平，从而使自己的理论知识及操作技能更上一个台阶，以便能更好的服务于患者。争取做一名优秀的护理人员，以无愧于白衣天使的光荣称号！

篇3：出科自我鉴定

在泌尿外科已经工作满一年了，从病房到特检室，再回到病房，整整一年，成长了，学习了，收获了。记得去年的这个时候，自己刚来到这个科室，一切都是陌生的，会做和能做的也都是最最基本的事情，而现在，我已经能独立上治疗班，能自己包组了。

起初，还没能适应新环境时，一些小事也做不好，其它的事情也不会做，有些不知所措，慢慢的，开始进入状态，很多新的事都努力去学去做，就算做错了也不气馁，总结了教训后再做，一段时间后明显觉得自己有所进步了，渐渐地开始学习上治疗班，刚开始上的时候，还不是很熟悉，还需要老师在一旁提醒、指点，上过几次后，就开始掌握了，渐渐地能独立上治疗班了，一切都在向前进步。

偶然的机会去到了特检室工作，是一个完全不一样的地方，学习到了新的知识和技能，学到了别人学不到的东西，又有了新的收获。再回到病房工作时，一开始没能调整过来，所以工作上有些乱，理清了思路、调整好状态后，一切又变得有条理了。之后开始独立包组，一开始做的不是很好，慢慢的学习后，有些进步了，现在基本上可以独立担任了。我还上了小夜班，小夜班主要就是协助中夜班护士一起工作，为患者做好术前准备，在上小夜班的同时，我还对中班和夜班的工作有了初步的了解，也为自己今后的工作做了准备。

从什么都不会到现在，自己学习到了泌尿外科的相关知识，学习了如何如患者进行沟通，从中知道了，其实自己要学的东西还很多，特别是与患者沟通方面，我觉得自己做的还不是很好，相信在以后的工作中，还会再继续去学习。在各位老师的指导下我熟练掌握了泌尿外科各项规章制度，严格遵守泌尿外科要求的无菌操作原则，也基本掌握了一些常见病的护理以及一些基本操作，学会了如何对患者进行术前术后的护理，这些都是我这一年来所收获的，在前不久，我还获得了“白衣天使展风采”的操作比赛二等奖，这是我工作以来第一次取得的成果，我很开心，当然，要继续努力，不断提高自我，争取能在以后的工作中，取得更优越的成绩。

在这一年的工作中，除了自己的努力外，当然也少不了老师们对我的指导，因为你们的耐心，我学习到了许多以前没学过的知识；因为你们的鼓励，就算我跌倒了也不怕，站起来继续向前进；因为你们的肯定，我对自己的工作越来越有自信。感谢老师们对我所付出的一切，在以后的工作中，我会更加努力，不断前进，愿自己能够更上一层楼。

篇4：出科自我鉴定

科室：消化科带教老师：

两周的时间稍纵即逝，在消化科的实习即将结束。利用这短暂时光，在老师的悉心教导下，经过理论与实践的结合，我学会了许多东西，但仍然深深的感觉，两周的时间对于消化系统这么庞大的知识体系来说远远是不够的，单单一个病区的病种都只是走马观花的学习。不过在这里，科里的老师们都很重视对实习生的教学工作，每周的实习安排也谨然有序，从而让我们循序渐进的学习与成长。

在实习期间，本人严格遵守医院及科室的规章制度，认真履行护士职责，严格要求自己，尊敬师长，团结同学，踏实工作，关心病人。不迟到，不早退，努力做到护理工作规范化，将理论与实践相结合，并做到理论学习有计划、有重点，护理工作有措施、有记录。

我所实习的科室是消化一病区，病人主要以消化道出血，胃肠息肉为主。大部分病人都需要做胃镜、肠镜检查，而主要的治疗措施是内镜下微创手术如ESD、POEM等。实习期间，在老师的带教下，我基本掌握了一些常见病的护理及基本操作。按时参加医院安排的班次及科室的教学查房，积极配合医生治疗，主动了解病人的情况，及时为病人排忧解难，尽最大的努力帮助他们。

经过这近一个月的消化科实习，使我对消化科常见病、多发病的诊断治疗有了重新的认识和提高，在突发病方面，学到了应对的知识和技巧。在消化科实习的日子里，我受益浅，虽然我还只是学生，我的能力有限，但我会不断摸索，用微笑温暖病人心田，用努力充实的知识与技能。温故而知新，用实践来验证及巩固所学。同时，也不断提高自己的职业水平丰富自己的专业知识。

篇5：出科自我鉴定

不知不觉咱们已在产科呆了一个月了，在这一个月来，使我充足扎实的学到了不少专业知识。妇产科不同于其余科室，它的专业功底是很雄厚的，只有真正的去努力学会吃透，才算得上是不断改进。

在带教王老师的指点下，每个礼拜我们都取得了理论的灌注，如：专科的知识要点，注意事项，护理操作。从而使我更深刻地舆论接洽到实践中去，比喻说，给婴儿洗澡时应留神什么，虽然还轮不到我们为婴儿洗澡，但我可从中学习，此外在产房的时候，为病人消毒皮肤，之中我有不足的处所，但我更乐意吸取教训，努力更正，争夺做好。

通过妇产科实习，坚固妇产科的实践常识，熟习妊娠、分娩、产后的畸形进程及其护理，异样过程及患病妇女的护理、打算生养跟妇女保健领导内容等，同时要懂得海内外新技巧、新疗法的进展情形，如互动式亲情沐浴、导乐分娩、婴儿抚触、婴儿游泳等以家庭为核心的护理技术，发展护理科研，撰写论文，培育学生的综合素质，进步学生的实际技巧。

产科的实习工作固然忙，但忙有所得。不论任何科室，我都会尽力踊跃地去做好！

篇6：出科自我鉴定

短短的1个月出科实习即将结束，回想这期间的点点滴滴，似乎在尝试无味瓶里的味道一样。临床的实习是对理论学习阶段的巩固与加强，也是对临床技能操作的培养和锻炼。我们倍偿珍惜这段时间，珍惜每一天的锻炼和自我提高的机会，珍惜与老师们这段难得的师徒之情。

本人在出科实习期间，遵守医院及科室各项规章制度，尊敬老师，团结同学，关心病人，不迟到早退。在带教老师的悉心指导下能完成生命体征的测量，新生儿的各项生活护理，以及新生儿培养箱，蓝光箱，心电监护仪的使用。希望在接下的科室能更完善自己，提高自己。出科是一个独特的科室，面对的是个个脆弱的小生命。这更让我意识到医生不仅要医术高，更要懂得如何和他们沟通。对待患儿和蔼可亲，态度良好，虽然有些时候会遇到很多焦虑的患儿家属口不择言，而我们医护人员能做的就是宽容。我们可以体会他们的心情，孩子生病，谁的心里都会着急万分的，说一些伤人的话我们是可以理解的。我们能做的就是继续为患者服务，力争做到最好。每天接触很多患儿和他们亲人的时候，我明白了人生最大的财富不是金钱而是生命和健康，而我们的职责正是捍卫健康的生命。经过1个月的实践我基本掌握了病程记录、会诊记录、出院记录等医疗文件的书写;掌握了临床出科的特点及出科常见、多发病人的诊治;掌握了常见化验的正常值和临床意义及和各类危、重、急病人的初步处理。

今后，我会继续以“热情、求实、尽职”的作风，持着主动求学的学习态度，积极各科室的老师学习，秉着“健康所系性命相托”的信念，孜孜不倦地吸收医学知识为日后的学习、工作打下坚实的基矗不断追求，不断学习，不断创新，努力发展自我，完善自我，超越自我是我崇尚的理念。

篇7：出科的自我鉴定

两周的时间稍纵即逝，在消化科的实习即将结束。利用这短暂时光，在老师的悉心教导下，经过理论与实践的结合，我学会了许多东西，但仍然深深的感觉，两周的时间对于消化系统这么庞大的知识体系来说远远是不够的，单单一个病区的病种都只是走马观花的学习。不过在这里，科里的老师们都很重视对实习生的教学工作，每周的实习安排也谨然有序，从而让我们循序渐进的学习与成长。

在实习期间，本人严格遵守医院及科室的规章制度，认真履行护士职责，严格要求自己，尊敬师长，团结同学，踏实工作，关心病人。不迟到，不早退，努力做到护理工作规范化，将理论与实践相结合，并做到理论学习有计划、有重点，护理工作有措施、有记录。

我所实习的科室是消化一病区，病人主要以消化道出血，胃肠息肉为主。大部分病人都需要做胃镜、肠镜检查，而主要的治疗措施是内镜下微创手术如ESD、POEM等。实习期间，在老师的带教下，我基本掌握了一些常见病的护理及基本操作。按时参加医院安排的班次及科室的教学查房，积极配合医生治疗，主动了解病人的情况，及时为病人排忧解难，尽最大的努力帮助他们。

超声科出科自我鉴定 篇6

自我鉴定是对自己过去某一阶段的学习或工作的自我分析和总结，它能够给人努力工作的动力，不如静下心来好好写写自我鉴定吧。你所见过的自我鉴定应该是什么样的？以下是小编为大家整理的超声科出科自我鉴定，供大家参考借鉴，希望可以帮助到有需要的朋友。

超声科出科自我鉴定1

我于xx年9月经过普通高考考入南方医科大学（原第一军医大学），本人性格开朗、稳重、有活力，待人热情、真诚。工作认真负责，积极主动，能吃苦耐劳。有较强的组织能力、实际

动手能力和团体协作精神，能迅速的适应各种环境，并融合其中。认真的学习态度和对本专业的浓厚的兴趣，让我在各方面都表现出色。

从大一开始，我就特别注重在认真学习好理论课的同时，努力培养自身的综合素质，为学好专业课打下了良好的基矗从理论转为专业，我热爱我的专业并为之投入了巨大的热情和精力，充分利用课余时间，拓宽知识视野，完善知识结构。通过阅读大量的课外相关书籍来充实自己的专业知识。在竞争日益激烈的今天，我坚信只有多层次，全方位，高要求的发展，并熟练掌握专业知识的人才，才符合社会发展的需要，才符合用人单位的需求，才符合自身发展的要求。

在校期间，我还积极参加学院。大学生运动会等多项大型活动，培养了我的交际能力，使我懂得了如何与人和睦相处。多年的军校生活造就了我不怕苦不怕累的态度，使我处事更务实、更有责任感。实习期间我严格遵守医院的各项制度，积累了丰富的工作经验，和完善的专业技能。这一切都是我不懈努力的结果，也是我所具有积极进取精神的体现。相信这将是我今后的工作的重要经验和宝贵财富。

深厚的专业知识，完整的知识结构，丰富的实践经验，乐观豁达的性格，严谨的军校生活，超强的团体协作精神和亲和力，定会助我在曲折中顺利完成各项工作任务。

愿贵医院给我一次尝试施展自己潜能的机会，我会尽心尽责，尽我所能，让贵医院满意，让患者满意！

超声科出科自我鉴定2

回顾这段时间的点点滴滴，虽然说不上激情澎湃，但毕竟我为此付出了，虽然收获不大，但远远超过了预想。如今，要离开带领我们踏入超声行列的老师们，心中的确有万分的不舍，但天下没有不散的筵席，此次分别是为了下次更好的相聚。

刚进入超声科时，有很多的不适应，理论和实际的结合对我来说还是那么陌生，在学校学习的那些东西被一点一点的抽取，这时才知道，在学校学习的东西是那么的稀少。

在这不足两个月的时间里，让我明白超声并没有想象中的那么容易，在学校学习的理论知识主要是诊断，然而在临床上，所见的并非都是标准的声像图表现，不同的患者即使是正常的结构，形态都各有千秋。还记得刚来的超声科的那一天，图像都还不认识，老师也很陌生，那个时候的我，几乎不知道从何入手，但是带教老师很快带着我融入了里面。一个星期后，环境等也熟悉的差不多了，老师开始安排着我们学习打报告。不要误以为打报告――无非就是在键盘上敲打、记录着老师的描述，其实并不是那么简单的！因为每天科室会有上百名患者就诊，平均每个患者在五分钟左右，一百名患者就是500分钟，而每天的上班时间其实只有450分钟，由而可想，打报告的准确性与速度的重要性。除了学习打报告之外，每周四下午，科室老师会安排时间给我们讲解一些关于超声的基础知识和一些典型病变的声像图表现，以此来巩固和丰富我们的知识。

此外，我还掌握了腹部、泌尿、妇科、以及浅表等的检查技术，并且掌握了这些疾病的诊断，进一步了解了心脏、外周血管、以及胎儿的二、三维的检查方法，同时也进一步了解了超声造影技术和利用超声进行引导的一系列穿刺活检技术。

通过这次的实习，我对自己的专业有了更为详尽而深刻的了解，对实际操作有了更多的了解，增强了专业知识的感性面及认识面，对所学的专业有了新的认识。从这次实习中，

我体会到了实际的工作与书本上的知识是有一定距离的，并且需要进一步的再学习。俗话说，千里之行始于足下，这些最基本的`技能是不能在书本上彻底理解的。短短的实习，让我大开眼界，也学会了不少东西，也让我对自己今后要从事的行业有所思考。这一个半月的实习仿佛让我在思想又得到了一次升华，心中又多了一份人生感悟。

这次实习让我深刻体会到读书固然是增长知识开阔眼界的途径，但是多一些实践，畅享于实践当中接触实际的工作，触摸一下社会的脉搏，给自己定个位，也是一种绝好的提高自身综合素质的选择。

超声科出科自我鉴定3

通过6周的超声科实习，我对超声科常见的疾病、工作流程有了初步的了解。超声检查的简便、快捷是其一个特点，每天要处理大量的病人，这也是我学会了如何进行医患沟通。第1周是见习阶段，我跟着带教老师学习如何准备病人以及如何描述病变、书写报告。第2~4周是b超实习阶段，我学习了超声扫查方式，扫查顺序级各种标准切面的扫查方法，并且对一些常见疾病有了一定的掌握。第56周是彩超实习阶段，我重点实习了心脏彩超，了解了心脏彩超的检查顺序，心脏彩超测量的径线值及其意义，初步掌握了部分常见疾病的诊断。整个实习阶段，我学会了超声的诊断报告书写，基本切面的解剖结构和一些常见病的超声诊断。每周由老师进行一次系统的实习进修医生讲座，让我系统、完整的学习了相关的知识，收获颇丰。

每天下午带教老师带着我进行床边超声的检查，我熟悉了住院病人常见的疾病诊断和如何在非标准体位下进行超声扫查。通过对门诊病人的超声扫查，我初步掌握了一些扫查方法和技巧，对超声多切面，多角度扫描有了更深一层次的体会，同时也锻炼了我的空间想象能力。

pcr出科自我鉴定 篇7

1 材料与方法

1.1 主要试剂

胰蛋白胨大豆琼脂 (TSA) 培养基、KF链球菌琼脂培养基和麦康凯培养基, 购自北京陆桥技术责任有限公司;5%兔血琼脂培养基和5%兔血牛脑心肉汤增菌培养基, 自配;烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 (NAD) , 购自北京索莱宝科技有限公司;马血清, 购自美国Hylone公司;细菌基因组DNA提取试剂盒, 购于天根生化科技 (北京) 有限公司;PCR Taq Mix、DNA Marker 2, 购自广东东盛生物科技有限公司。

1.2 方法

1.2.1 细菌的分离

用无菌接种环沾取肺表面纤维渗出物、心包液或关节液涂抹在玻片上, 用火焰固定后进行革兰染色和姬姆萨染色, 光学显微镜下观察。同时将其分别接种在含0.05% NAD和含5%马血清的TSA培养基、KF链球菌琼脂培养基、5%兔血琼脂培养基、麦康凯培养基以及5%兔血牛脑心肉汤增菌培养基, 分别置于含5% CO2的厌氧培养箱中, 37 ℃培养24~48 h, 观察有无细菌生长。

1.2.2 PCR检测

无菌采集有纤维渗出物的肺组织1 g, 匀浆, 加入3 mL灭菌生理盐水制成悬浮液, 冻融1次, 2 000 r/min离心3 min;去除杂质, 取上清液10 000 r/min离心2 min, 保留沉淀物。对于心包液或关节液, 则取1 mL于无菌EP管内振荡30 s, 按上述方法离心操作。最终取离心沉淀物按细菌基因组DNA提取试剂盒说明进行, 所得DNA用于PCR检测。按相关文献进行细菌16S rRNA基因和副猪嗜血杆菌16S rRNA基因的PCR鉴定, 以广西兽医研究所细菌研究室保存的血清4型副猪嗜血杆菌DNA作为PCR阳性对照。细菌16S rRNA基因序列为上游引物27F 5′-AGAGTTTGATC (C/A) TGGCTCAG-3′, 下游引物1492R 5′-TACGG (C/T) TACCTTGTTACGACTT-3′, 扩增片段约 1 400 bp;副猪嗜血杆菌16S rRNA基因序列为上游引物5′-GTGATGAGGAAGGGTGGTGT-3′, 下游引物5′-GGCTTCGTCACCCTCTGT-3′, 扩增片段约822 bp。引物由上海英骏生物技术有限公司合成。PCR反应体系 (50 μL) :PCR Taq Mix反应液24 μL, 上、下游引物各0.5 μL, 模板5 μL, ddH2O 20 μL。PCR反应条件:95 ℃预变性5 min;95 ℃ 1 min, 52 ℃ 1 min, 72 ℃ 1 min, 共35个循环;72 ℃延伸10 min。取8 μL PCR产物在10 g/L琼脂糖凝胶上电泳, EB染色。若有目的片段, 将PCR反应产物送上海英骏生物技术有限公司测序。

2 结果

2.1 细菌检测结果

用无菌接种环沾取肺表面纤维渗出物、心包液或关节液涂抹在玻片上, 火焰固定后进行革兰染色和姬姆萨染色、观察, 结果在油镜下均可见紫蓝色、球状、球杆状或少数呈短纤维状的菌体。

用无菌接种环沾取肺表面纤维渗出物、心包液或关节液分别接种在含0.05% NAD和5%马血清的TSA培养基、KF链球菌琼脂培养基、5%兔血琼脂培养基、麦康凯培养基以及5%兔血牛脑心肉汤增菌培养基上, 分别置于含5% CO2的厌氧培养箱中, 37 ℃培养24~48 h, 均未观察到菌落生长。

2.2 PCR检测结果

分别用副猪嗜血杆菌16S rRNA基因诊断引物和细菌16S rRNA基因通用引物对从肺渗出物以及关节液提取的DNA模板进行PCR扩增, 副猪嗜血杆菌16Sr RNA基因引物未扩增出目的片段, 而细菌16S rRNA通用引物对来自南宁市、贵港市和北流市的病料均扩增出目的片段, 见图1。

M.DL-4 500 Marker;1.副猪嗜血杆菌对照; 2~4.病料分别来自南宁市、贵港市和北流市。

对PCR产物进行测序, 测序结果与GenBank上登录的猪鼻支原体 (登录号为GU227400和GU227402) 序列进行同源性比较, 它们之间的同源性为97. 5%~99.6%, 证明检测材料中含有猪鼻支原体, 见图2。

3 讨论

1) 猪鼻支原体主要由带菌母猪或病猪经过飞沫和直接接触传播, 3~10日龄的仔猪最易感染发病。尽管多数感染猪不表现临床症状, 但在一些疫病复杂或保健措施不健全的猪场, 发病率和死亡率分别达到10%和20%。猪鼻支原体感染猪临床表现与副猪嗜血杆菌病极其相似, 都出现胸/腹膜炎 (渗出物) 、心包炎和关节肿大等病变, 导致保育猪、育肥猪生长性能下降。由于猪鼻支原体与副猪嗜血杆菌病的临床症状极为相似, 在本次检测中, 笔者误将此3个病例当作副猪嗜血杆菌病来处理, 在进行细菌分离培养时, 将3份疑似副猪嗜血杆菌病料接种在TSA培养基、KF链球菌琼脂培养基、5%兔血琼脂培养基、麦康凯培养基以及5%兔血牛脑心肉汤增菌培养基上并未观察到任何可疑致病性菌落生长;然而, 病料经抹片、火焰固定、革兰染色和姬姆萨染色, 在油镜下均可观察到大量呈紫蓝色、球状、球杆状或少数呈短纤维状排列的多形态菌体。为了查明所观察到的是何种病原菌, 笔者利用16S rRNA基因在细菌中具有高度保守性和特异性的特点[1], 应用PCR技术对其16S rRNA基因进行扩增、克隆和测序。测序结果表明:3份病料扩增的病原菌序列与副猪嗜血杆菌16Sr RNA基因序列完全不同;与GenBank上已登录的2株猪鼻支原体的16Sr RNA基因序列有高度同源性。综合PCR技术鉴定以及病原菌染色特征和形态观察结果, 判断猪鼻支原体是引起3个规模猪场断奶保育猪此次发病的主要病原。

2) 猪鼻支原体和副猪嗜血杆菌在外因诱导下都能导致猪发病, 出现相似的临床症状[2]。猪鼻支原体感染在兽医临床上易被误诊为副猪嗜血杆菌病, 从而造成疾病治疗的延误, 也容易造成药物的滥用。在当前猪病病原复杂的情况下, 不能单纯根据某种疾病的某些典型临床症状进行疾病的判断, 应根据病原分离和PCR检测结果进行确诊后再实施治疗方案。

3) 猪鼻支原体对猪场的危害不但普遍被养殖者忽视, 也没有商品化疫苗进行预防免疫。能否依靠猪肺炎支原体疫苗对猪鼻支原体进行交叉免疫保护仍有待研究。笔者认为应更侧重于药物保健, 应用泰乐菌素、泰妙菌素、林可霉素、替米考星和强力霉素等在预计发病前3周左右拌料投喂10 d, 可有效控制支原体肺炎的继发或混合感染。或者进行脉冲式给药, 即在短时间内大剂量用药, 使药物在疾病发生过程中能迅速达到血药浓度和组织中的药物浓度, 迅速发挥疗效。使用药物最大用药剂量连用3~5 d, 停用1~2 d后, 再连用3~5 d。进行脉冲式给药也可以有效防止细菌耐药性的产生, 延长抗菌药物的使用寿命。以上3个规模猪场按照此方案, 在做好其他病毒性疾病基础免疫的前提下, 经过半年的治疗生产已恢复正常。

摘要：2009年8月份至2010年6月份, 广西贵港市、北流市和南宁市3个规模化猪场保育猪陆续出现体温升高、关节肿大、心包炎和腹腔炎等疑似副猪嗜血杆菌病症状, 部分病猪发生死亡, 为了研究其病原, 试验应用PCR技术对病猪肺渗出物和关节液提取的DNA模板进行细菌16S rRNA基因的PCR扩增和测序。结果表明:引起广西省3个规模猪场出现疑似副猪嗜血杆菌病症状的病原是猪鼻支原体。

关键词：PCR,猪鼻支原体,PCR

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