胃蛋白酶原C基因八篇

胃蛋白酶原C基因 篇1

1 资料与方法

1.1 一般资料

我院2014年4月~2015年4月收治胃部病变患者200例, 均实施病理学检查确诊。其中男120例, 女80例, 年龄34~75 (52.6±7.5) 岁。入选标准:符合中华医学会关于胃癌的诊断标准[3]。200例患者中, 胃癌患者20例, 其中低分化癌10例, 中分化癌6例, 高分化癌4例;良性胃部患者180例, 其中胃溃疡40例, 浅表性胃炎80例, 胃息肉60例;另选取同期健康人群200例为对照组, 排除患者消化道、肾脏及肝脏疾病史, 排除患者精神疾病史。两组患者的性别、年龄、病史等一般情况无显著性差异 (P>0.05) , 具有可比性。

1.2 方法

患者入院后均给予常规检查和综合护理, 于清晨采空腹静脉血5ml, 分离血清后进行保存。采用东芝生化分析仪检测分析PGⅠ、PGⅡ;通过ELISA法检测RegⅣ;定量检测所用仪器为Bio-RAD公司的荧光PCR仪;采用罗氏电化学发光法检测CEA、CA19-9水平。

1.3 试剂与仪器

PGⅠ、PGⅡ试剂盒选自北京美康生物技术研究中心, RegⅣ、ELISA试剂盒选自深圳匹基生物公司;东芝120生化分析仪、Bio-RAD公司i-Cycler荧光PCR仪、意大利Alisei酶标仪等。

1.4 统计学分析

采用SPSS 17.0统计软件进行统计分析, 采用χ2或t检验, P<0.05为差异, 具有统计学意义。

2 结果

2.1 各组血清PGⅠ、PGⅡ、RegⅣ、CEA和CA19-9水平比较

胃癌组患者的血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ水平均显著低于对照组和良性组, 良性组血清血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ水平显著高于对照组, 胃癌组患者的RegⅣ、CEA和CA19-9水平均显著高于对照组和良性组, 结果具有统计学差异 (P<0.05) 。见表1。

2.2 血清PG联合RegⅣ筛查胃癌早期诊断的比较

血清PG联合RegⅣ检验胃癌患者的敏感性72.1%和特异性78.3%显著优于血清CEA联合CA19-9检验的55.7%和59.2%, 结果具有统计学差异 (P<0.05) 。见表2。

3 讨论

胃癌是临床常见的恶性肿瘤疾病, 其发病率高, 病死率高, 严重影响了患者的健康和生命。因此, 早期诊断和治疗具有重要的临床意义。目前, 临床诊断胃癌常用检查为胃镜和造影, 但这两种检查操作复杂, 费用高昂, 患者痛苦, 且患者存在明显病变才能确诊, 使得多数早期胃癌患者漏诊, 失去最佳的治疗时机[4]。故本次研究探讨血清胃蛋白酶原与再生基因Ⅳ联合检验胃癌早期, 取得了良好的辅助诊断效果。血清PG作为胃黏膜的特异性功能酶, 包括PGⅠ和PGⅡ, 通过检测PGⅠ和PGⅡ, 反映出机体胃部不同部位胃黏膜的功能状况。有研究显示, 良性胃炎如浅表性胃炎的PGⅠ和PGⅡ的含量均较高, 而胃癌、不典型增生及肠上皮化生等的PGⅠ和PGⅡ的含量则较低。这与本次研究结果一致。究其原因可能与良性胃病细胞数量增加, PG分泌量增加, 而胃癌细胞数量减少, 或部分被肠上皮所替代, 导致PG含量降低所致。RegⅣ是一种胃肠道和胰腺的分泌性蛋白, 胃癌患者的RegⅣ表达显著增强, 其产物可促进细胞增殖, 加快胃癌病情的发展, 其表达水平与肿瘤分期、患者预后等显著相关[5,6]。临床上通过检测血清PG和RegⅣ, 有效的对胃癌早期进行筛查, 对临床诊断具有较高的辅助作用。本次研究探讨血清PG与RegⅣ联合检验对胃癌早期诊断的应用, 研究结果显示:200例患者中, 胃癌患者20例, 其中胃癌组患者的血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ水平均显著低于对照组和良性组, 良性组血清血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ水平显著高于对照组, 胃癌组患者的RegⅣ、CEA和CA19-9水平均显著高于对照组和良性组, 血清PG联合RegⅣ检验胃癌患者的敏感性72.1%和特异性78.3%显著优于血清CEA联合CA19-9检验的55.7%和59.2%, 结果具有统计学差异 (P<0.05) 。综上所述, PG与RegⅣ联合检验, 具有较高的特异性和灵敏性, 对临床早期诊断胃癌具有较高的辅助诊断价值。

参考文献

[1]祝新华, 费凤英, 王金金.血清胃蛋白酶原检测在胃部疾病诊断中的意义[J].检验医学, 2012, 27 (1) :48-49.

[2]王江红, 易楠, 王钰.血清胃蛋白酶原在胃癌及胃癌前病变诊断中的意义[J].重庆医学, 2011, 40 (27) :73-74.

[3]邱峰, 朱国民.三种血清胃蛋白酶原检测方法在胃癌筛查中的比较分析[J].检验医学, 2012, 27 (11) , 17-18.

[4]张金锋.血清胃蛋白酶原、CEA、CA19-9及CA72-4检测对胃癌的诊断价值探讨[J].检验医学, 2014, 24 (8) :26-27.

[5]李国斌, 黄容旺, 范文伟, 等.血清胃蛋白酶原与再生基因Ⅳ联合检验对胃癌早期诊断的应用价值[J].重庆医学, 2014, 09 (14) :74-75.

胃蛋白酶原C基因 篇2

1 资料与方法

1.1 病例资料

选取2013年5月-2014年12月于贵州省肿瘤医院病理检查确诊为子宫颈癌,且无转移、无系统治疗的141名汉族患者作为病例组,平均年龄(44.0±3.0)岁;同期在贵州省肿瘤医院体检的汉族女性健康体检者为对照组,平均年龄(41.8±4.5)岁。

1.2 实验试剂及仪器

1.2.1 主要试剂

聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)Mix(北京天根生化科技有限公司),引物合成为正向引物:AACATCAGATCCCCAGAAAAC AG,反向引物:GGTGAGCAAGAGAAATGAAGAA(上海生工生物工程股份有限公司),MarkerⅠ(北京天根生化科技有限公司),限制性内切酶Mn IⅠ(立陶宛MBI Fermentas公司),琼脂糖(西班牙Biowest公司)。

1.2.2 主要仪器

PE9700扩增仪(美国ABI公司),DNA成像分析器Gel Doc EQ(美国Bio-Rad公司),DYY–Ⅲ–5型稳压稳流电泳仪(北京六一仪器厂),Millipore超纯水仪(美国Millipore公司)。

1.3 DNA标本收集

收集乙二胺四乙酸二钾抗凝全血,离心吸取白细胞层,置入-60℃冰箱冷冻保存。

1.4 血浆Fg浓度测定

统计子宫颈癌患者于检验科初次检测的血浆Fg浓度。

1.5 DNA提取

利用酚-氯仿法提取282份样本DNA,置入-60℃冰箱分装冷冻保存。

1.6 PCR扩增

PCR反应体系为25μl,含模板DNA和引物各1μl,Taq酶13μl,双蒸水9μl;反应条件:95℃预变性5 min,95℃变性50 s,54℃退火60 s,72℃延伸70 s,共35个循环后,72℃再次延伸5 min,扩增产物降温至4℃冰箱保存备用。

1.7 PCR扩增产物的检测

取5μl PCR产物,于2%琼脂糖凝胶、5×Tris-硼酸缓冲液中,以141 V电压,电泳约60 min,以分子量为100~700 bp的Marker为相对分子质量标准,在紫外成像仪下观看并分析。

1.8 PCR产物酶切分型

反应体系中加入5μl PCR产物,2μl 10×buffer,0.5μl限制性核酸内切酶(Fg448G/A的内切酶为MnlⅠ),加双蒸水至25μl,37℃恒温孵育16 h,酶切产物按1.6进行电泳并在紫外成像仪下观看和分析结果。

1.9 统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件进行数据分析,计数资料以率表示,用χ2检验。基因型及等位基因频率利用直接计数法进行统计分析。采用非条件Logistic回归法计算比值比(odds ratio,OR)及95%可信区间(confidence interval,CI),P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 子宫颈癌患者各基因型Fg水平分析

子宫颈癌患者GG、GA及AA基因型分别为76、60和5例,血浆Fg水平浓度分别为(3.09±0.22)、(3.11±0.26)和(3.312±0.505)g/L,差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2 PCR产物结果

2.2.1 Fgβ448 G/A基因分型PCR产物鉴定

Fgβ448 G/A多态性片段PCR产物经电泳后经紫外灯观察,可见PCR产物中有427 bp大小的条带。见图1。

2.2.2 Fgβ448 G/A基因酶切产物分型鉴定

Fgβ448 G/A PCR扩增片段为427bp,有2个MnlⅠ酶切位点的产物片段,GG基因型酶切产生183、132和112 bp 3个片段,AA基因型缺乏其中1个MnlⅠ酶切位点,酶切后产生315和112 bp 2个片段,GA基因型酶切后产生315、183、132和112 bp 4个片段。见图2。

M:Marker;3、6、7:GG型;2、5:AA型;1、4、8:GA型

2.2.3 PCR产物碱基序列测定

随机在病例组GG、GA和AA 3个基因型的标本中,各抽取1个标本进行目的片段扩增,得到的3份扩增产物送上海生物工程股份有限公司进行碱基序列检测。见图3。

2.3 Fgβ448 G/A基因多态性Hardy-Weinberg平衡检验

Fgβ448 G/A基因多态性进行Hardy-Weinberg平衡检验,病例组及对照组人群基因型及等位基因分布均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。见表1。

2.4两组Fgβ448 G/A基因型及其等位基因频率分布

对病例组与对照组Fgβ448 G/A基因型及其等位基因频率分布进行比较,经χ2检验,两组中各基因型及等位基因频率分布差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.5 Fgβ448 G/A基因型对子宫颈癌的相对危险性

对样本的统计结果进行非条件单变量Logistic回归分析,探讨Fgβ448 G/A基因多态性与子宫颈癌发生、发展的相关性,结果表明,GA+AA型相对于纯合子GG型,能使子宫颈癌发病率显著升高。见表3。

A:Fgβ448 G/A基因型在第166处有G 1个峰;B:Fgβ448 G/A基因型在第157处有G、A 2个峰;C:Fgβ448 G/A基因型在第165处有A 1个峰

(n=141)

例(%)

例(%)

3 讨论

Fg是由肝细胞合成、分泌的一种急性时相反应糖基化蛋白[9],半衰期为3~4 d,占血浆成分的2%~3%,约为2~4g/L[10],是血浆中含量最高的凝血因子,其由分子量为67.6 k D的α链、分子量为52.3 k D的β链及分子量为48.9 k D的γ链的3条肽链通过二硫键连接后形成二聚体[10],使其成为肿瘤细胞和宿主细胞间的分子桥梁,与高表达Fg受体α5β1、αvβ3整合素或CD54分子等内皮细胞上的受体结合,促使肿瘤细胞和靶器官内皮细胞之间的黏附作用,加上Ⅱb和Ⅲa的复合物是血浆Fg的受体,所以机体内的肿瘤细胞能够借助血浆Fg和血小板的Ⅱb和Ⅲa复合物相互作用,形成大的复合物聚集体,从而逃脱人体免疫系统的杀灭作用。Fg作为不同黏附分子的配体,能增加血液中有型成分及肿瘤细胞间的黏附结合[7],在肿瘤转移中起至关重要的作用。

本研究发现,基因型以Fgβ448的纯合子GG和杂合子GA为主(>90%),而纯合子AA基因型较少(<10%),与龚五星等[11]的研究结果相似。病例组Fgβ448 G/A基因GG、GA、AA分为0.539、0.426和0.035;对照组Fgβ448 G/A基因GG、GA、AA分为0.667、0.326和0.007,差异有统计学意义(χ2=6.422,P=0.040),推论出Fgβ448 G/A的基因多态性和子宫颈癌的发生有一定的相关性。通过对样本的统计结果进行非条件单变量Logistic回归分析,结果显示,杂合型GA与纯合子AA虽未直接显示与子宫颈癌发生、发展有差异性,但其P值接近于0.05,杂合型GA的^OR=1.61(95%CI:0.99,2.63),纯合子AA的^OR=6.18(95%CI:0.07,54.07),推测只要扩大研究的样本量,基因型GA和AA会与子宫颈癌的发生有关,且研究中表明GA+AA能使子宫颈癌发生的可能性升高(χ2=4.799,P=0.028),^OR=1.71(95%CI:1.06,2.77),而A等位基因与G等位基因的分布则有明显的差异(χ2=5.187,P=0.023),^OR=1.61(95%CI:1.07,2.43),可以推测Fgβ448 G/A位点单个碱基的改变在子宫颈癌的发病中发挥重要作用。

而在针对患者血清Fg水平的研究中发现,子宫颈癌患者GG、GA及AA基因型分别为76、60和5例,血浆Fg水平浓度分别为(3.09±0.22)、(3.11±0.26)和(3.312±0.505)g/L,差异无统计学意义(P>0.05)。但整体水平上,A等位基因的水平高于G等位基因,推测是因为141例子宫颈癌患者均是初次确诊且无转移,而其血浆Fg水平尚未发生明显改变。总之,Fgβ448 G/A基因多态性用于易感人群的检测,对子宫颈癌的早期防治具有重要的临床意义。Fgβ448 G/A基因多态性与子宫颈癌的发生可能具有相关性。

摘要：目的 探究在子宫颈癌发病过程中与纤维蛋白原(Fg)β448 G/A基因多态性的相关性。方法 采用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性分析的方法对2013年5月-2014年12月初次就诊的汉族子宫颈癌患者141例标本与同期收集的健康汉族女性体检者141例标本的Fgβ448 G/A基因多态性进行基因型分型检测,并对检测结果进行统计分析。结果 1病例组Fgβ448 G/A基因型频率及等位基因频率与对照组比较,病例组高于对照组(P<0.05);2A等位基因与子宫颈癌的发生密切相关,3子宫颈癌GG、GA及AA基因型的血浆Fg水平分别是(3.09±0.22)、(3.11±0.26)和(3.31±0.51)g/L,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Fgβ448 G/A基因多态性变化与宫颈癌的发生可能具有相关性。

关键词：子宫颈癌,基因多态性,纤维蛋白原

参考文献

[1]FERREI RA D S,KOIFMAN,INTO-AANTOS,et al.Polymorphisms and viornmental risk factors associated with ceruical carcinogensis in a cohort of Brazilian wonen with cervical lesions[J].Jounary of oxicology and Environment Health,2010,73(13/14):888-900.

[2]王学峰,赵雅莅.肿瘤患者凝血及纤溶分子标志物变化[J].中华医学检验杂志,2000,23(6):331-333.

[3]王淑娟,许亚茹,元小冬,等.血尿酸与纤维蛋白原Bβ链基因多态性及其功能表达的关系[J].免疫学杂志,2010,26(11):956-961.

[4]JACQUEMIN B,ANTONIADES C,NYBERG F,et al.Common genetic polymorphisms and haplotypes of fibrinogen alpha,beta,and gamma chains affect fibrinogen levels and the responseto proinflammatory stimulation in myocardial infarction survivors[J].J Am Coll Cardiol,2008,52(11):941-952.

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胃蛋白酶原C基因 篇3

【关键词】NIP；CRP；WBC；PCT；诊断价值

【中图分类号】R4 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2016）05-0021-02

NIP是一种威胁新生儿生命安全的呼吸系统疾病，主要因胎儿在围生期感染细菌导致。在感染早期，患儿无典型临床症状，且病原菌检测的耗时较长，诊断难度较大。所以，找寻灵敏度较高的检测指标对尽早确诊、病情评估、治疗方案的选择具有重要作用。WBC是血常规检测的一个指标，可以反映机体的免疫状况，辅助诊断感染性疾病[1]。CRP、PCT属于炎症因子，是机体炎症反应的特异性指标。正常状态下PCT水平变化较小、CRP水平极低，感染后PCT、CRP水平会迅速增高。所以，对患儿进行CRP、WBC、PCT水平检测可以了解感染程度，为早期诊断NIP提供诊断依据。

1 资料和方法

1.1 一般资料

观察对象为2015年1月-2016年1月在我院收治的80例NIP患儿，所有患者均符合《儿科学》关于NIP诊断标准，患儿家属均签署知情同意书。45例细菌感染患儿分为观察组，男24例，女21例，日龄2-26d。35例非细菌感染患儿分为实验组，男18例，女17例，日龄3-28d。50例健康新生儿分为对照组，男26例，女24例，日龄2-27d。三组受检者的一般资料无显著性差异（P>0.05）。

1.2 研究方法

采集3ml空腹静脉血进行WBC、PCT、CRP测定，CRP、WBC检测仪器为2120血细胞分析仪及其配套试剂，分别采用细胞化学染色技术、免疫荧光检测法进行检测。CRP阳性即CRP水平超过10mg/L，WBC超过20×109/L即为阳性。PCT检测仪器为江苏基蛋生物科技生产的降钙素原试剂盒及其配套试剂，采用胶体金法进行检测，PCT阳性即PCT水平超过2μg/L。使用抗菌药物治疗一周，记录治疗前后检测结果。

1.3统计学方法

采用spss17.00处理 ， ±s表示计量资料，经t检验，P<0.05有统计学意义。

2 结果

2.1 WBC、PCT、CRP水平

观察组的PCT、CRP、WBC水平及下降幅度>实验组>对照组（P<0.05）；对照组治疗前后指标无明显变化（P>0.05）见表1。

2.2 NIP患儿WBC、PCT、CRP单独及联合检测的阳性率

单独检测时，PCT阳性率>CRP>WBC，联合检测阳性率明显高于单项指标检测见表2。

3 讨论

细菌感染是引起NIP的主要原因，容易并发心力衰竭、休克、呼吸衰竭等并发症，死亡率较高。所以，选择简单、创伤小的检测指标对快速、准确的了解儿的感染程度，改善患儿预后有重要作用。WBC是血常规检测的一个指标，能够反映机体的病理性变化，特别是感染细菌后水平会明显上升。但是WBC易受药物、环境等因素干扰，影响结果的准确性，如表2中WBC阳性率仅为45.00%。PCT是人体必需氨基酸的组成部分，无激素活性。不受非细菌感然病变因素的影响，在体内处于低水平稳定状态[2]。但是，机体出现细菌感染后PCT会有明显上升的现象，远远超过高于正常水平。且感染程度越严重PCT水平越高，炎症消退后随即恢复正常水平，对NI病情评估有重要作用。CRP是炎症因子破坏正常机体细胞后人体内的应激反应指标，炎症早期会又升高现象，在急性感染期会急剧升高。所以，CRP可以作为细菌感染的特异性检测指标[3]。本文中，观察组PCT水平远远超过实验组和对照组，阳性率为90.00%，说明PCT对NIP的敏感性最高。观察组、实验组CRP水平均大于对照组，说明感染患儿的CRP水平明显高于健康新生儿，CRP、PCT水平与细菌感染程度成正相关。三项指标单独检测的阳性率有差异，但联合检测阳性率达到96.25%，检测准确率高。

因此，WBC、PCT、CRP水平可以反映感染程度，联合检测的准确率高。操作简单，时间短，准确率高，不仅可以判定感染程度，还可以在治疗过程中动态观测患儿恢复情况，在NIP诊断中具有较高的诊断价值。

参考文献：

[1]黄世立.降钙素原、超敏C反应蛋白联合白细胞检测在新生儿感染性肺炎诊疗中的价值[J].江西医药，2016，51（7）：717-719.

[2]张伟明.降钙素原联合C-反应蛋白、白细胞诊断新生儿感染性肺炎临床分析[J].临床医学，2015，35（10）：19-20.

胃蛋白酶原C基因 篇4

为评价转蜘蛛杀虫肽与Bt毒蛋白C肽融合蛋白基因小黑杨对杨扇舟蛾Clostera anachoreta(Fabricius)的抗性,采用苗木套笼饲喂法和石蜡切片法,对取食转基因小黑杨的杨扇舟蛾幼虫的发育、死亡情况和中肠结构进行了研究.结果表明,杨扇舟蛾幼虫分别取食TT3(转基因无性系3)、TT1(转基因无性系1)和CK(非转基因对照)小黑杨后总历期依次为35.63天、30.39天和28.74天,幼虫化蛹率依次为12.1%、29.3%和44.3%,平均蛹重依次为0.1077g、0.1714 g和0.1893 g.转基因小黑杨能明显延长杨扇舟蛾幼虫的.发育历期,降低化蛹率和蛹重.同时,转基因小黑杨有抑制幼虫蜕皮、增加其死亡率和致蛹畸形的作用,且能破坏幼虫中肠,使中肠细胞排列松散、肠腔食物减少、中肠变形,其破坏作用随时间延长而加剧.一般来讲,TT3对杨扇舟蛾的各种影响作用均大于TT1.

作 者：范海娟 胡春祥 王志英 刘桂丰 FAN Hai-Juan HU Chun-Xiang WANG Zhi-Ying LIU Gui-Feng  作者单位：东北林业大学林学院,哈尔滨,150040 刊 名：昆虫学报  ISTIC PKU英文刊名：ACTA ENTOMOLOGICA SINICA 年，卷(期)：2006 49(5) 分类号：Q965.9 关键词：小黑杨   蜘蛛杀虫肽   Bt   杨扇舟蛾   抗性  

★ 乳牛瘦蛋白基因荧光定量RT-PCR检测方法的建立

★ 基因检测演讲开场白

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胃蛋白酶原C基因 篇5

关键词：发热,血清降钙素原,C反应蛋白,诊疗

在临床上, 发热性疾病最为常见, 该病可以由病毒、细菌及其他微生物引起, 如何区分感染性疾病和非感染性疾病呢, 最初, 医务人员采用白细胞计数、血沉区分, 这些检测虽然有参考价值, 但无特异性, 不能区分病毒、细菌、支原体等感染, 造成抗生素的过度应用[1], 降钙素原 (PCT) 和C反应蛋白 (CRP) 在近些年被高度关注, 现已把它们作为判断感染程度的指标, 该文章通过对白细胞计数、CRP及PCT进行检测和分析, 探讨其临床意义。

1 资料与方法

1.1 研究对象:

2012年3月至2012年9月于我院儿科病房住院的发热患儿共148例作为研究对象, 这部分患儿于住院前已行血常规检测示白细胞升高, 其中小于1岁72例, 1~6岁44例, 6~12岁32例。所有患儿发热时体温均>37.4℃, 发热至入院时间为1~7 d。该部分患儿为实验组, 同期选取非感染发热患儿共40例作为对照组。

1.2 研究方法:

所有患儿入院后24 h均采静脉血, 进行血常规、CRP、PCT的检测, 并对所有患儿进行及时的抗菌治疗, CRP检测采用电化学发光法, 使用仪器为Cobas-6000, 试剂盒为厂家提供, 以>0.5 ng/m L为阳性;CRP检测采用免疫比浊法, 使用仪器为HITACH-7170, 试剂是美康生物有限公司提供, 以>10 mg/L为阳性。发热患儿在治疗5 d后复查血常规、CRP、PCT。

1.3 统计学分析:

所有数据采用SPSS15.0统计软件包完成, 计数资料采用t检验, 以P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患儿PCT、CRP浓度比较:

经过实验测定, 实验组PCT浓度 (76.38±17.28) ng/m L, CRP (48.07±20.04) mg/L均远远高于对照组, 经比较, 差异具有统计学意义, 见表1。

注:*P<0.05

2.2 两组患儿PCT、CRP的几个诊断性评价指标的比较:

根据表2可得知, PCT的灵敏度和特异性分别为79.93、93.26;CRP的灵敏度和特异性分别为84.47、50.04, 约登指数分别为73.19和34.51。

2.3 实验组治疗前后PCT、CRP、中性粒细胞的比较:

由表3可得知, 实验组在治疗后中性粒细胞、PCT、CRP均较前明显下降, 经比较, 治疗前后数据之间具有统计学意义。经过Spearman相关分析得出, 中性粒细胞和PCT (r=0.473, P<0.05) , CRP与中性粒细胞 (r=0.509, P<0.05) , PCT、CRP与中性粒细胞 (r=0.497, P<0.05) , 3个指标呈现正相关性。

注:*P<0.05

3 讨论

儿童的免疫系统发育不完善, 比较容易发生感染性疾病, 我国感染性疾病的发生率为0.1%~1%, 病死率较高, 为15%~50%, 有的患儿临床症状不明显, 这对医务人员的早期诊断和及时治疗带来很大的麻烦[2]。近些年, PCT、CRP逐渐应用于临床, 用于检测是否患有感染性疾病, 而且应用越来越普及, 逐渐得到医务人员的认可。

当体内有严重细菌、真菌、脓毒症等感染时, PCT水平在体内逐渐上升, 但当自身免疫、过敏、病毒感染时PCT不会升高, 而且局部感染、轻微感染也不会升高, 在这里, 侵入细菌产生的内毒素产生了至关重要的作用。PCT还反映了全身炎症的严重程度, 所以PCT升高可出现于全身炎性反应综合征、严重感染患儿身上, 即使我们未发现感染灶, PCT升高提示该患者身体某个部位已存在严重感染, 为临床上治疗提供依据[3]。

C反应蛋白是肝细胞合成的一种急性蛋白, 机体受到细菌感染时或者组织损伤时体内出现上升的蛋白质, 病毒感染不上升, 可在机体受到损伤时数小时内迅速升高, 病情好转后可呈现下降趋势, 升高幅度与感染的程度呈现正相关。而且, 受到感染后, CRP比WBC上升的早, 具有很高的灵敏度。CRP不仅在细菌感染时上升, 在肿瘤患者也可上升, 所以CRP特异性不如PCT好[4]。

该研究所有患儿均进行PCT和CRP的检测, 实验组患儿PCT、CRP水平均远远高于对照组, 说明, 这两项指标为检测感染性疾病的指标, 而对于非感染性疾病患儿, 这两项指标无意义。这提示医务人员在临床上检测这两项指标上升时要考虑该患儿存在感染性疾病, 即使未找到感染源, 也应及时应用抗菌药物。而且PCT的灵敏度和特异性均较高, 可以作为检测感染性疾病的重要指标, 而CRP特异性较低, 因为一部分应激反应等因素均可导致CRP升高, 所以对于细菌感染, PCT的诊断价值高于CRP, 而且PCT的约登指数高于CRP, 更加验证了这点。经过一段时间的治疗, 发热患儿病情均得到控制, 患儿白细胞、PCT、CRP均较前下降, 治疗前后具有统计学意义, 经过相关性分析可得出, 3个指标均呈正相关, 这提示PCT联合CRP检测对诊断发热性疾病的患者具有重要的意义, 这与国内一些研究相符合[5,6,7,8,9,10]。

综上所述, PCT、CRP均是诊断感染性疾病的重要指标之一, 这二者联合检测可提示该发热患者为感染性发热还是非感染性发热, 在临床上感染性疾病的早期诊断、及时治疗和病情监测具有重要意义。

参考文献

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胃蛋白酶原C基因 篇6

本研究选取我院2015年1月至2015年12月收治的老年重症肺炎患者102例为研究对象, 对老年重症肺炎患者的PCT和CRP水平变化情况进行统计研究, 从而探索这些变化与疾病预后的相关性, 并讨论其临床意义。现本研究具体报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年1月至2015年12月因脑血管疾病就诊于唐都医院神经外科ICU的老年重症肺炎患者102例为研究对象。患者中, 男性56例, 女性46例, 年龄61~82岁, 平均 (68.8±9.6) 岁。患者的诊治参考2007年美国胸科学会 (american thoracic society, ATS) 和美国感染病学会 (infectious diseases society of america, IDSA) 制订的标准[2,3,4]和中华医学会呼吸病学分会公布的社区获得性肺炎诊断和治疗指南标准 (2005年) 。

根据年龄将老年患者分为60~69岁组38例, 其中男性21例, 女性17例;70~79岁组34例, 其中男性19例, 女性15例;≥80岁组30例, 其中男性16例, 女性14例。同时根据患者转归情况分为生存组87例, 其中男性47例, 女性40例;死亡组15例, 其中男性9例, 女性6例。本研究内容通过医院伦理委员会审核并通过, 所有患者及其家属均对本研究知情并签署协议书。

1.2 方法

研究对象于入住ICU当日按常规采静脉血2 m L, 用于测定PCT、CRP水平, 并常规进行血液白细胞 (white blood cell, WBC) 计数和中性粒细胞 (neutrophil, NEU) 分类。用电化学发光法测定PCT值, 仪器采用罗氏Cobase 601型全自动电化学发光免疫分析系统及其配套试剂 (北京东方迈润医疗器械有限公司) , PCT参考值为0.0~0.5μg/L, 检测值≥0.6μg/L为阳性。用速率散射比浊法测定CRP值, 仪器用芬兰Orion Dianostica公司的Quick Read分析仪及配套试剂盒 (北京隆盛自动化设备有限公司) , 参考值为0~10 mg/L, 若检测值≥11.0 mg/L则为阳性。WBC计数和NEU分类采用迈瑞全自动五分类血细胞分析仪BC 5800及配套试剂 (北京康和源医药科技发展有限公司) 。

1.3 统计学方法

本研究获得的所有数据均采用SPSS16.0统计学软件处理, PCT、CRP、WBC、NEU等计量资料用±s表示, 多组间用方差分析, 组间两两比较用LSD检验, 用Logistic回归分析法进行受试者工作特性曲线 (receiver operating characteristic curve, ROC) 分析以确定诊断性敏感度和特异性, P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各年龄组患者血清PCT、CRP、WBC和NEU水平比较

分析数据可得, 60~69岁组、70~79岁组、≥80岁组三组患者组间比较, 血清PCT和CRP值差异存在统计学意义 (P<0.05) , 同时这些值从低到高排列为 (≥80岁组) > (70~79岁组) > (60~69岁组) , 但三组患者WBC和NEU差异不明显 (P>0.05) , 结果见表1。

注:与60~69岁组比较, *P<0.05;与70~79岁组比较, #P<0.05。

2.2 生存组与死亡组患者的PCT和CRP水平比较

检测对象中, 死亡组患者血清PCT和CRP水平明显高于生存组患者, 组间比较, 差异具有统计学意义 (P<0.05) , 但WBC和NEU水平比较, 差异不具有统计学意义 (P>0.05) , 见表2。

注:与生存组比较, *P<0.05。

2.3 联合检测PCT和CRP的意义

评估老年重症肺炎病情时, 用ROC下面积 (area under curve, AUC) 对检测的PCT和CRP进行分析。结果表明, 单独检测PCT时, AUC为0.879, 敏感度为0.884, 特异性为0.391;单独检测CRP时, AUC为0.809, 敏感度为0.775, 特异性为0.702。联合检测PCT和CRP时, AUC为0.890, 敏感度为0.896, 特异性为0.771。以上数据表明, 评估重症肺炎老年患者病情时, 联合检测PCT和CRP, AUC、敏感度和特异性均优于单一检测。

3 讨论

老年重症肺炎可以使多系统多器官受累并引起严重损伤, 从而危及生命。肺炎发生时, 终末呼吸道、肺泡及肺间质发生炎症, 是老年患者常见病症之一, 也是导致老年患者死亡的重要病因之一[2,3,4]。

CRP是一种应激拮抗性反应蛋白, 当应激发生时肝细胞合成功能提高, 血清CRP水平从生理时极低状态快速反应性升高, 当病变好转时则下降[5,6,7]。研究表明, 在严重细菌感染引起炎症反应或组织损伤时, 血清CRP均可明显升高[8,9,10], 表明CRP是一项判断细菌感染严重程度有意义的指标。本研究检测CRP的敏感度和特异性结果也表明了这一点。但CRP缺乏特异性, 多种致病因素发生时, 如创伤、肿瘤、病毒感染和自身免疫性疾病, 虽然血清中CRP浓度升高, 也只能作为一项参考指标[11,12,13]。

无激素活性的PCT是一种降钙素前肽物质, 作为13 k D的糖蛋白, 组成的氨基酸共有116个。体内PCT含量极低, 半衰期短, 仅24 h左右, 但在体外具有很好的稳定性。当发生细菌、真菌感染或寄生虫感染时PCT可呈反应性升高, 但无菌性炎症或病毒性感染则反应很低或无反应[13,14,15]。因此, 在细菌感染性疾病的诊断和治疗过程中, 可根据PCT检测水平来观察疾病的治疗效果, 这一点已经受到临床的广泛重视[16,17,18]。

本文研究结果表明, 随着年龄的增加, 老年重症肺炎患者血清PCT和CRP值上升, 其水平差异具有统计学意义 (P<0.05) , 表现为 (≥80岁) 组> (70~79岁) 组> (60~69岁) 组, 但WBC和NEU差异不明显 (P>0.05) 。同时死亡组患者血清PCT和CRP值高于生存组, 差异也具有统计学意义 (P<0.05) 。该结果提示, 针对老年重症肺炎患者, 检测其PCT和CRP水平对预测疾病转归具有一定参考价值。根据既往已有报道, 在一些重症感染患者中, PCT较CRP升高早而显著, 同时随着疾病的恢复其值也较快达到发病前水平, 而CRP水平与疾病严重程度相关不明显[17,18,19,20]。但在本研究中, 发现两者均与疾病发展有一定的相关性, 这是否与样本量小或者患者年龄等因素有关, 尚有待扩大样本量制作进一步的临床研究来证实[21]。

ROC曲线也称敏感度曲线 (sensitivity curve) , 在曲线上的各点反映着相同的敏感度, 它们都是对同一信号刺激的反应。ROC曲线的绘制是以假阳性率为横坐标, 真阳性率 (灵敏度) 为纵坐标, 以其曲线下相对面积大小来确定诊断价值[15,16,17]。本文研究结果表明, PCT和CRP指标用于评估老年重症肺炎患者诊断准确性时, 以联合测定较为合适, 也更加具有临床意义。

胃蛋白酶原C基因 篇7

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2014年4月-2016年4月本院接收的365例产妇为研究对象。产褥感染诊断: (1) 产妇产后体温升高且>38℃, WBC计数>10×109/L, 均呈持续性增高状态; (2) 经实验室检查结果显示, CRP>8mg/L, 经药敏实验、病原体培养、分泌物涂片检查、病原体抗原等检查确诊。

1.2 方法

PCT测定:借助干式免疫荧光定量法进行测定, 仪器选用于Getein1600及配套试剂, 操作严格根据说明书进行, 分别于产妇产后3d内对其静脉血进行采集, 每次3m L。将血液行3000r/min离心, 时间为15min, 待血清分离后, 检测时间应在24h以内。PCT水平临界值<0.5μg/L, 当PCT≥0.5μg/L提示可判定为阳性, 存在感染可能。

CRP检测:仪器生化全自动分析仪AU5400, CRP检测原理为免疫比浊法, 试剂盒均选北京九强生物试剂有限公司, 为确保检测结果具有一致性, 检测均由专业检测人员严格根据操作说明实施。

血培养:使用全自动连续性检测系统BACTEC9120全自动培养仪, 相关血培养瓶均选自美国BD公司, 对送检血培养标本持续进行检测, 该仪器具有自动报警系统, 检测时一旦发现细菌生长, 即可发出警报。将报警后血培养及时转种到相应的培养基中, 经孵育分离单个菌落, 借助Phonenix100微生物全自动鉴定仪进行病原菌鉴定, 并根据其报警时间、阳性次数及患者产妇临床表现进行判定。

1.3 统计学处理

应用SPSS18.0分析数据, 资料计量采用平均数标准差 (±s) 表示。

2 结果

2.1 临床结果分析

对本研究365例产妇临床结果进行分析, 其中出现产褥感染36例 (9.86%) , 未出现329例 (90.14%) , 其中产褥感染包括9例 (25.00%) 外阴炎、10例 (27.78%) 阴道炎、6例 (16.67%) 子宫颈炎、8例 (22.22%) 子宫内膜炎、3例 (8.33%) 盆腔腹膜炎。本研究产妇均排除产后出现产褥感染以外感染类疾病。感染者PCT水平为 (6.93±2.18) μg/L, 未感染者PCT水平 (0.33±0.11) μg/L;感染者CRP水平 (30.11±9.67) mg/L, 未感染者 (9.09±1.27) mg/L;经血培养判定阳性者39例 (病原菌共51株) , 其中金黄色葡萄球菌19株 (37.25%, 19/51) 、大肠杆菌6株 (11.76%, 6/51) 、鲍氏不动杆菌12株 (23.53%, 12/51) 、白色念珠菌5株 (9.80%, 5/51) 、厌氧链球菌3株 (5.88%, 3/51) 、其他6株 (11.76%, 6/51) 。

2.2 三种方法单独测定及联合测定价值分析

对三种方法单独及联合测定结果进行分析, 三者联合测定准确度、灵敏度、特异度均优于单独测定。其中PCT检测准确度、灵敏度、特异度依次好于CRP单独测定及血培养测定。各方法准确度、灵敏度及特异度详情见表1。

3 讨论

产褥感染属于细菌感染性疾病之一, 也是临床产妇致死的主要原因, 因产妇妊娠期生理状况存在一定改变, 产后自身抵抗力差, 因多种因素影响容易出现感染, 严重时还将造成脏器损伤、衰竭, 增加产妇临床死亡率。

PCT属于降钙素前肽物, 不存在降钙素样激素活性, 体内稳定性较好。相关研究表明, PCT在细菌性或非细菌感染中特异性及敏感性较高, 是感染鉴别主要标志物。临床多通过PCT来判断患者是否存在细菌感染并对其感染程度进行判定, 机体出现细菌感染时PCT明显增高, 可根据其判定结果指导临床进行干预。有研究称[3], 临床多以PCT水平<0.5μg/L作为临界值进行感染判定。与本研究判定方法一致, 且本研究结果显示, 感染者PCT水平 (6.93±2.18) μg/L高于未感染者 (0.33±0.11) μg/L。CRP属于血浆蛋白的一种, 主要因肿瘤坏死因子-α及白细胞介素-6诱导产生, 临床多根据其浓度增加来判定是否存在炎性反应或组织损伤。相关研究表明[4], 若产妇出现PCT升高或持续处于高水平状态或PCT浓度下降过程中快速升高, 结合患者临床表现可判定产褥感染。此研究结果与本研究一致, 感染者CRP水平 (30.11±9.67) mg/L明显高于未感染者 (9.09±1.27) mg/L。血培养是以往临床诊断是否存在感染的确诊方法, 但是血培养所需时间相对较长, 且抽血前不能使用抗生素, 患者抽血过程中有可能造成一定污染会对最终血培养结果准确度、敏感度造成影响, 效果不理想。本研究结果显示, 经血培养判定39例阳性, 其中病原菌共51株。

相关研究[5]认为, PCT、CRP、血培养三种测定方法联合使用可提高检测准确度、敏感度及特异度。与本研究结果相符, 三种方法联合测定准确度、灵敏度、特异度均好于单独测定。其中PCT检测方法应用价值高于CRP单独测定及血培养测定。

综上所述, 血清降钙素原联合C反应蛋白及血培养在测定产科重症感染中的效果较好, 其准确度、敏感度、特异度均较高, 有助于产科重症感染的早期诊断, 同时在判断治疗效果和预后等方面有重要的临床价值, 值得推广应用。

摘要：探讨血清降钙素原联合C反应蛋白及血培养在产科重症感染中的应用。选取甘肃省酒泉市人民医院2014年4月-2016年4月接收的365例产妇临床资料进行回顾性分析, 分别于产后3d内对产妇静脉血进行采集, 均行血清降钙素原及C反应蛋白、血培养测定, 分析产妇产褥感染出现情况并对其检验分析结果进行对比。PCT检测灵敏度、准确度、特异度好于CRP及血培养。三者联合测定准确度、灵敏度、特异度均好于单独测定。产科重症产褥感染测定中使用血清降钙素原联合C反应蛋白及血培养的敏感度、特异度及准确度均较高, 有临床推广价值。

关键词：血清降钙素原,C反应蛋白,血培养,产褥感染

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胃蛋白酶原C基因 篇8

1 资料与方法

1.1 病例选择

2008年10月~2011年9月入住我院重症监护病房(ICU)的83例细菌感染患者,平均年龄(55±16)岁,其中重症感染组47例和局部感染组36例,以上病例均经过本院实验室病原学或血清学检查以及影像学检查诊断确诊。对照组30例,均为本院内科病房非感染患者,平均年龄(46±17)岁,排除严重肝肾功能损害、急性心肌梗死、活动性肺结核、恶性肿瘤、结缔组织病、慢性肝病及肺部以外的细菌感染等引起CRP增高的疾病。

1.2 留取标本与检测

所有患者入院后第1天空腹抽取静脉血3 m L置于无菌带塞试管中,凝固后于常温3 000 r/min离心5 min,留取血清于4℃冰箱保存待测。PCT采用半定量快速检测法测定,以大于0.5 ng/m L为阳性。CRP采用免疫散射速率比浊法进行检测,正常参考值0~3 mg/L。所有操作均严格遵守试验标准操作进行。

1.3 统计学处理

治疗前后比较采用配对t检验,三组均数间比较采用方差分析,均数间两两比较采用q检验,P<0.05为差异有显著性。

2 结果

非感染组与感染组治疗前血清PCT与CRP浓度比较,感染组血清PCT与CRP浓度较非感染组均明显升高,差异有显著性(P<0.05),见表1。

注:1)非感染组与重症感染组比较,P<0.01;2)非感染组与局部感染组比较,P<0.01

感染组经积极的抗菌药物治疗,治疗后血清PCT与CRP浓度较治疗前明显降低,差异有显著性(P<0.01),见表2。

注:与治疗前比较,P<0.01

3 讨论

在重症监护病房,患者病情重,免疫功能低下,侵入性检查治疗较多,极易合并获得性细菌感染。长期以来,细菌感染一直是临床医生所面临的重大课题[1],感染的发生直接影响患者的预后,有的患者因重症感染不能及时有效地控制,导致脓毒症和多脏器功能障碍综合征(MODS),是导致重症患者死亡的主要原因[2]。尽管随着影像诊断技术的进步及实验室检测手段的增多,但是仍缺乏一种敏感的动态监测细菌感染的指标。细菌实验室培养存在时间较长、影响因素多、阳性率不高和耐药性增加等诸多问题,不能及时对患者病情做出诊断而延误患者的治疗。高海拔地区由于其特殊的低气压、低氧环境的特点,一旦出现重症感染,加之高原缺氧,其疾病发展和演变较平原地区更为迅速和严重。降钙素原(PCT)的发现为重症感染的监测提供了新的手段。

前降钙素原(PCT)是1975年由MOYA等发现,首先于脓毒症患者血清中检测到的蛋白,正常生理状况下,PCT主要由甲状腺滤泡旁细胞产生且浓度低(<0.1 ng/m L)。PCT在体内外的稳定性很好,半衰期长达22~35 h。在全身感染后4 h后即可检测到,6 h急剧上升,并在6~24 h维持该水平[3]。国外学者研究认为其浓度高于0.5 ng/m L意味着有急性感染或炎性反应,而严重细菌感染或脓毒症时血清PCT水平升高明显,可达1 000 ng/m L,故PCT可用来早期检测脓毒症,并快速评估其严重程度[4,5]。因此,PCT由于其独特的生理学特点,对于脓毒症的早期诊断有重要的临床应用价值,对严重的全身性感染其早期诊断特异性高达90%以上。即血清中PCT浓度可以用于早期判断是否存在全身细菌感染。PCT在细菌感染时浓度升高,在手术创伤、病毒感染和局部炎症疾病时保持低水平,这种变化迅速而且稳定,是PCT有别于其他指标的特征之一,也是区别病毒感染和细菌感染最灵敏的指标。在严重感染时明显升高的PCT在积极治疗后下降到非常低,说明全身感染和全身炎症反应得到控制。血清C反应蛋白(CRP)是急性时相反应蛋白的一个极灵敏的指标,是反映全身性炎性反应的非特异性标志物,CRP可以引发对浸入细胞的免疫调节作用和吞噬作用。临床上已将血清CRP作为感染性疾病的诊断和疗效观察的重要指标之一,但对重症患者早期细菌感染的诊断价值评价不一。近年研究表明,PCT对细菌感染的诊断和鉴别诊断、疗效及预后的判断,比CRP和各种炎性反应因子更敏感[6,7],更具有临床实用性,但PCT的水平受内毒素及其他一些炎性介质的影响。因此CRP作为诊断细菌感染的重要标志物之一已广泛应用于临床。但研究资料表明,在严重多发伤早期,仍有许多其他因素可影响血CRP水平(如组织损伤、非感染性炎性反应、应激反应等),因此单独检测CRP对严重多发伤早期感染的诊断无可靠意义。PIHL等[8]指出超敏CRP(hs-CRP)可提高对细菌性感染检测的敏感度,但却是无助于提高区分细菌感染或非细菌感染的特异性。结合以上特点,该院研究高海拔地区细菌性感染的重症患者中联合检测血浆PCT和CRP水平,结果表明感染组治疗前血清PCT与CRP水平较非感染组明显增高,血清PCT和CRP的水平随着细菌感染的炎症反映严重程度的加重而增高,经过及时有效的抗菌治疗可使升高的PCT水平迅速降低,甚至恢复至正常水平,说明血清PCT与CRP水平的动态监测对细菌性感染患者早期诊断、病情及预后判断中有非常重要的意义。

综上所述,PCT操作简便,检测方便,对感染诊断准确率高,特异性强,帮助临床医生及早做出诊断,有效区别细菌与非细菌感染,指导临床早期及时、合理地应用抗生素,可根据PCT水平及其改变情况评估感染的严重程度和预测患者的预后情况[9,10,11,12]。而PCT和CRP的联合动态测定会提高细菌感染性疾病的诊断和病情判断的正确性,指导临床医师抗菌药物的正确应用,减少过度使用抗菌素所致的细菌耐药性增加,有效控制和降低医院感染发生率,使患者尽快康复。

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