阿司匹林的快速鉴别法三篇

阿司匹林的快速鉴别法 篇1

蜂蜜除葡萄糖和果糖外, 富含蛋白质和氨基酸以及铁、锌、钙、镁等多种微量元素等营养成分。果葡糖浆是由植物淀粉水解和异构化制成的淀粉糖浆, 主要成分为葡萄糖和果糖。

笔者运用微波消解和电感耦合等离子体质谱 (ICP-MS) 技术[9], 测定油菜蜜、洋槐蜜、紫云英、枣花蜜等安徽常见4种蜂蜜中Ca、Fe、Mg等12种元素的含量, 以及果葡糖浆中12种元素的含量。运用酸水解—全自动氨基酸分析仪法技术[1], 测定油菜蜜、洋槐蜜、紫云英、枣花蜜等安徽常见4种蜂蜜中17种氨基酸和蛋白质的含量, 以及果葡糖浆中17种氨基酸和蛋白质的含量, 结果如表1所示。可以看出, 蜂蜜中含有一定量的蛋白质, 而糖浆中不含蛋白质。可以通过测定蛋白质含量, 快速判别蜂蜜掺假情况。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验仪器、器皿:电子天平、烧杯、试管、滴管等;试验试剂:碘酒 (浓度为2%) 、乙酸乙酯 (分析纯) 。

1.2 试验方法

在10 m L试管中加入蜂蜜1 g和碘酒1 m L, 摇荡均匀, 加入乙酸乙酯2 m L, 用水定容至10 m L刻度线处, 剧烈震荡20 s, 静置2 min, 观察、比较絮状物分层情况。试验温度为常温 (25℃) 。蜂蜜剧烈震荡, 产生红色絮状物, 并慢慢富集在溶液上层;果葡糖浆在剧烈震荡, 无絮状物析出, 无分层, 通体为红色。

1.3 试验原理

蜂蜜中蛋白质等大分子物质在碘液的作用下, 使蛋白质变性, 产生不透明现象。在剧烈震荡条件下, 乙酸乙酯与水2种不同性质溶剂相容, 产生微小气泡, 起到“凝聚核”作用, 凝聚析出物, 产生絮状物, 并随着气泡上浮, 红色絮状物慢慢富集到溶液上层, 根据絮状不溶物的有、无或多、少, 判断蜂蜜掺假行为, 具体如图1所示。

2 结果与分析

2.1 方法线性范围和检出限

对含有不同比例果葡糖浆的蜂蜜进行系列测试试验, 考察其能准确测试范围和最低测试点。以100%蜂蜜、80%、60%、40%、0%蜂蜜 (糖浆) 为横坐标, 试验中上层絮状物体积 (表2) 为纵坐标, 得到曲线 (图2) , 线性回归系数R=0.999 1, 具有良好的线性关系。以100%蜂蜜和糖浆为参照物, 能准确鉴别掺20%以上糖浆蜂蜜的真假行为。蜂蜜掺假行为通常均掺40%以上果葡糖浆。

2.2 方法稳定性 (精密度)

精密度是指在规定的测试条件下, 同一个均匀供试品经多次取样测定所得结果之间接近的程度。选择100%蜂蜜、40%蜂蜜和果葡糖浆3组样品, 运用该方法进行5次平行稳定性测定。稳定性试验见表3、图3, 均符合要求。

2.3 与国标方法比对结果

设计蜂蜜、果葡糖浆及掺假蜂蜜样品组, 运用该方法测定, 同时将此5组样品运用现有国标方法同时测定, 并进行比对, 结果见表4。可以看出: (1) 设计不同蜂蜜掺假行为, 该方法能够有效鉴别蜂蜜掺假行为。 (2) 对于国家标准方法能有效测定的, 该方法也可准确判定, 具有很好的一致性。如GB/T18932.1稳定碳同位素比率法对掺大米糖浆 (C3植物糖不能判定) , GB/T 18932.2薄层色谱法、GB/T 21533离子色谱法对不含寡糖的植物糖不能判定, 而采用试验方法皆能准确判定。 (3) 对于国标方法标准测定盲区 (掺不含寡糖 (多糖) 大米糖浆的蜂蜜) , 该方法也能有效鉴别, 弥补了相关检测方法的不足。

2.4 蜂蜜的测试试验

与蜂产品企业专家一起采购、验证原蜜, 运用该方法与专家感官鉴定方法同时对原料蜜验收, 其掺假鉴别方面结果基本一致。从市场上购买20余种蜂蜜, 运用该方法进行测定, 掺假蜂蜜达到50%之多。

3 结论与讨论

通过对蜂蜜和糖浆成分全面剖析, 探索一种简便、快速鉴别蜂蜜中糖浆掺假方法。该方法无需大型仪器、特定场所和专业技术人员等, 可以简便、快速鉴别蜂蜜中糖浆掺假行为;该方法能准确鉴别掺20%以上糖浆蜂蜜的真假行为, 特别适合蜂产品企业对原料蜜验收的粗筛查。与相关国家方法鉴别标准比对验证, 结果令人满意。

参考文献

[1]赵成仕.夏春.酸水解-全自动氨基酸分析仪测定蜂蜜中17种氨基酸[J].现代农业科技, 2013 (3) :325-326.

[2]沈晓玲.蜂蜜品质检测与掺假的鉴别方法[J].中国蜂业, 2007, 58 (8) :30-31.

[3]袁玉伟.蜂蜜掺假鉴别技术的研究进展与对策建议[J].食品科学, 2010, 31 (9) :318-320.

[4]朱青.蜂蜜掺假检测方法的研究进展[J].中国蜂业, 2008, 59 (10) :35-37.

[5]冯婧媛.掺果葡糖浆蜂蜜的快速检测方法[J].安徽农业科学, 2011, 39 (14) :8588-8589.

[6]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局, 中国国家标准化管理委员会.GB/T18932.1-2002蜂蜜中碳-4植物糖含量测定方法稳定碳同位素比率法[S].北京:中国标准出版社, 2002.

[7]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局.GB/T 18932.2-2002蜂蜜中高果糖淀粉糖浆测定方法薄层色谱法[S].北京:中国标准出版社, 2002.

[8]中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局, 中国国家标准化管理委员会.GB/T 21533-2008蜂蜜中淀粉糖浆的测定离子色谱法[S].北京:中国标准出版社, 2008.

阿司匹林的快速鉴别法 篇2

关键词：固相萃取,GC-MS,胆固醇,潲水油,鉴别

我国是世界上食用植物油消费量最大国家, 每年的消费总量大约是2 500万t, 废弃油脂量逐年上升, 有些不法商人在利益驱动下, 将劣质潲水油 (废弃油) 经加工后作为食用油销售。据专家用年消费总量减去年国内食用植物油生产量和进口量推算, 每年返回餐桌的潲水油有200万~300万t之多, 以潲水油假冒食用植物油或在食用植物油中掺混潲水油等恶劣事件, 对社会与食品安全都造成非常大的危害, 直接危及人体健康, 长期摄入甚至可成为癌变诱因。

据最新研究表明:潲水油或掺混了潲水油的食用植物油中可检出动物源性成分———动物胆固醇。《餐饮业废油脂与合格食用植物油指标检测值比较表》中规定食用植物油胆固醇含量低于50mg/kg, 废油脂胆固醇含量400mg/kg[1]。建立食用植物油中动物源性成分———胆固醇检测方法, 是鉴别食用植物油中是否混有潲水油的重要指标之一, 对今后制 (修) 订食用植物油安全卫生标准提供基础性研究数据, 确保食品安全。

目前, 油脂中的胆固醇的提取方法主要以国标皂化提取法为主[2~3], 此种方法操作复杂、耗时长, 提取效率低, 而逐渐被快速高效除杂效果好的固相萃取法取代[4]。通过检测胆固醇方法来鉴别潲水油的方法研究比较多, 主要有气相色谱法[5]、气相色谱-质谱联用法[6]、薄层色谱法[7]和电导率法[8]等, 各方法各有优缺点, 其中认可度最高的是气相色谱-质谱联用法。

本方法采用固相萃取法快速提取油脂中的胆固醇, 去除色素和杂质干扰;与气相色谱-质谱 (GC-MS) 联用建立测定油脂中胆固醇含量的自动分析方法, 15min内完成油脂中胆固醇的提取, 30min内完成胆固醇的含量的测定, 便于快速鉴别潲水油。

1 试验材料与方法

1.1 仪器材料及试剂

1.1.1 仪器

GCMS-QP2010气相色谱-质谱联用仪, 日本岛津 (中国) 有限公司;LR4000型试验型旋转蒸发仪, 海道夫 (德国) 有限公司;AL204-2C电子分析天平, 梅特勒托利多仪器有限公司。

1.1.2 材料

硅胶固相萃取小柱:500mg/6m L DIKMA Pro Elut SI, 迪马科技有限公司;地沟油、火锅油、散装菜籽油和金龙鱼菜籽油。

1.1.3 试剂

胆固醇 (CAS 57-88-5) 标准品:纯度≥99%, SIG-MA, 美国杰华森有限公司。

所用试剂中甲醇、正己烷和乙醚均为色谱纯, 德国CNW技术有限公司。

胆固醇标准储备液 (1 000mg/L) :准确称取100mg胆固醇标准品于100m L容量瓶中用正己烷溶解后定容。

胆固醇标准工作溶液:用正己烷逐级稀释胆固醇标准储备溶液, 配成胆固醇浓度为2.0、10、20、50、100、150、200和250mg/L, 备用。

1.2 样品的前处理

(1) 将油脂充分混匀后取0.5g, 加入5m L正己烷, 涡旋1min混匀后得到待净化液。

(2) 将待净化液加入硅胶固相萃取小柱, 弃去流出液;再用8m L正己烷∶乙醚 (V∶V=98∶2) 溶液淋洗, 弃去流出液;最后用20m L正己烷∶乙醚 (V∶V=90∶10) 溶液淋洗, 收集流出液。

(3) 被收集的流出液于旋转蒸发仪上, 在真空度300~500k Pa, 温度为45℃条件下浓缩至近干 (10~50μL) , 用1m L甲醇涡旋溶解后, 经过0.45μm有机相滤膜后, 待GC-MS测定。

1.3 GC-MS的测定条件

1.3.1 色谱条件

测定条件色谱柱:岛津Rtx-5MS毛细管柱, 30m×0.25mm×0.25μm;载气:氦气 (99.999%) , 柱流速0.9m L/m L, 进样口温度290℃, 分流进样:分流比30∶1, 进样量1μL。

升温程序 (20min) :初始温度150℃ (保持5min) , 以20℃/min升温至290℃ (保持10min) 。

1.3.2 质谱条件

离子源接口温度260℃, 离子源温度200℃, 四级杆温度150℃, 离子化方式EI, 采集方式:选择离子法 (SIM) , 扫描时间16.39~18.39min, 选择特征离子386.00、145.00和275.00, 溶剂延迟3min, 调谐方式为自动调谐。胆固醇定量离子色谱图和选择离子扫描质谱图分别如图1和图2所示。

2 结果与讨论

2.1 胆固醇固相萃取

DIKMA Pro Elut SI硅胶固相萃取小柱 (DPS) 对胆固醇的吸附力强于对油脂中其他脂类和游离脂肪酸的吸附力。用5m L正己烷溶解的油脂样品DPS, 胆固醇和部分大分子脂肪酸酯被吸附于DPS固定相上。

研究了正己烷和乙醚作为胆固醇淋洗净化液的进化洗脱效果, 试验中发现仅用非极性的正己烷淋洗时, 淋洗液体积消耗比较大, 约需120m L才能将洗脱胆固醇完全;如果仅用乙醚洗脱, DPS固定相吸附的大分子脂肪酸酯与胆固醇分离比较难, 几乎被同时洗脱下来;由此洗脱液进行了正己烷与乙醚的互配, 最终选择用8m L正己烷∶乙醚 (V∶V=98∶2) 溶液淋洗DPS固定相的大分子脂肪酸酯, 弃去流出液, 再用20m L正己烷∶乙醚 (V∶V=90∶10) 溶液洗脱DPS固定相的胆固醇, 收集流出液用, 试验得出此方法的胆固醇回收率大于95.0%。

2.2 方法的标准曲线与检出限

2.2.1 线性关系

用正己烷配制一系列的胆固醇标准溶液, 在最佳试验条件下, 进行线性试验。在2~250mg/L范围内, 胆固醇的质量浓度 (C∶mg/L) 与对应峰面积 (H) 呈现良好的线性关系, 绘制标准曲线为H=921.57C+157.12, 相关系数R2=0.9993。

2.2.2 检出限

将一定质量浓度的胆固醇的标准溶液分别逐级稀释, 进样。当信噪比等于3时, 所对应的标准溶液中胆固醇质量浓度为0.12mg/L即为检出限。

2.3 方法回收率与精密度

用地沟油、火锅油、散装菜籽油和金龙鱼菜籽油进行了1个水平的胆固醇加标回收率试验, 每个加标水平测定3次, 并与国标食品中胆固醇的皂化提取和比色法[2]相比较, 结果见表1。

由表1可知:地沟油和火锅油中胆固醇含量均为442.4mg/kg可归为潲水油, 散装火锅油和菜籽油胆固醇含量分别为199.3和60.38mg/kg, 均大于50mg/kg, 表明这两种油脂中可能掺加潲水油, 而金龙鱼菜籽油中胆固醇未检出, 说明此菜籽油中没有添加潲水油。方法回收率在97.9%~103.2%, 回收率明显优于国标法, 其最高回收率仅为92.4%, 说明皂化法对胆固醇提取率低, 固相萃取法提取率高, 在15min即可将油脂中的胆固醇提取出来, 比传统的皂化法提取胆固醇节约时间和试剂, 提取效率高。

3 结论

固相萃取-气相色谱质谱联用快速测定油脂中的胆固醇, 提取和检测在1h内完成, 提取率优于传统的皂化法, 检测方法采用气相色谱质谱联用自动分析法, 自动进样分析, 减少了传统比色法人为的操作误差, 提高了检测结果的准确性。方法的检出限较低为0.12mg/L, 线性范围为2~250mg/L, 线性范围宽, 方法精密度高, 相对标准偏差低于3.2%。该方法能满足油脂中胆固醇的检测方法指标要求, 试剂消耗量少, 可作为潲水油的快速鉴别手段。

参考文献

[1]肖庆敏, 刘树宝, 于洪起, 等.生产控制中植物油掺伪的鉴别方法研究[J].中国油脂, 2002, 25 (3) :43-46.

[2]GB/T 5009.128-2003食品中胆固醇的测定[S].

[3]GB/T 22220-2008食品中胆固醇的测定高效液相色谱法[S].

[4]吴钟玲, 何仲强, 郭茂章, 等.固相萃取-GC/MS法测定油脂胆固醇含量的研究[J].包装与食品机械, 2011, 29 (6) :20-23.

[5]吴圣明, 杨虹, 潘浴清, 等.气相色谱法快速测定动植物油脂中的胆固醇[J].农业机械:粮油加工, 2011 (7B) :78-80.

[6]张芯, 祖丽亚, 樊铁, 等.测定胆固醇含量鉴别地沟油[J].中国油脂, 2006, 31 (5) :65-67.

[7]尹平河, 潘剑宇, 赵玲, 等.薄层色谱法快速鉴别潲水油和煎炸老油的研究[J].中国油脂, 2004, 29 (4) :47-49.

阿司匹林的快速鉴别法 篇3

1 仪器与样品

1.1 仪器

车载近红外光谱仪 (MATRIS-F, 德国Bruker公司) ;铟镓砷 (InGaAs) 检测器;1.5m固体光纤探头;OPUS软件 (5.5版本) 。

1.2 样品

东北制药总厂 (简称D厂) 49批, 哈药集团三精制药有限公司 (简称H厂) 31批, 山西仟源制药有限公司 (简称S厂) 13批, 共计93批。

2 方法

2.1 原始光谱谱库和平均光谱谱库的建立

将近红外光谱仪置于25℃洁净无尘环境中, 每次扫描样品前, 仪器预热30min, 以仪器内置参比做背景校正。每批取6瓶样品, 每瓶各测定1次作为原始光谱, 6瓶测定的平均值作为平均光谱, 谱区范围4000/cm~12000/cm, 并将每批样品的完整信息以光谱文件名形式保存。

2.2 聚类分析模型的建立

调取平均光谱库中的所有光谱作为参考光谱, 选择5612.2/cm~4879.3/cm作为分析谱段。选取一阶导数的方法处理光谱, 13点平滑模式。可将全部光谱分成2大类:一类囊括了D厂全部规格样品31批次、H厂规格为4g的样品4批次、S厂规格为2g和4g的样品7批次;另一类包括了D厂规格为1g和2g的样品45批次及S厂规格为1g的样品6批次。

2.3 一致性检验模型的建立与验证

一致性检验是一种快捷的图谱比较方法, 将待测光谱的CI与之前设定的CI限度 (CI limit) 进行比较, 从而比较未知光谱与某一组参考光谱是否具有一致性。

CI= (参考光谱i–待测光谱i) /参考光谱i

按生产单位的不同将全部原始光谱分成三组, 分别建立注射用磷霉素钠的一致性检验模型。

2.3.1 D厂的一致性检验模型

调取D厂样品的原始光谱作为参考光谱 (198张) , 以H厂样品的全部平均光谱为测试光谱 (31张) , 选择7498.3/cm~4242.9/cm作为分析谱段, 选用二阶导数, 17点平滑, CI限度设定为5.0, 则全部测试光谱均在限度范围外。

2.3.2 H厂的一致性模型

调取H厂的原始光谱作为参考光谱 (124张) , 以D厂样品的全部平均光谱为测试光谱 (49张) , 选择7552.3/cm~6584.2/cm和6036.5/cm~4065.4/cm作为分析谱段, 选用一阶导数+矢量归一化的方法, 25点平滑, CI限度设为5.0, 则全部测试光谱均在限度范围外。

2.3.3 S厂的一致检验性模型

调取S厂的原始光谱作为参考光谱 (52张) , 以H厂样品的全部平均光谱为测试光谱 (31张) , 选择6190.7/cm~4547.6/cm作为分析谱段, 选用二阶导数+矢量归一化的方法, 13点平滑, CI限度设为5.0, 则31张测试光谱中有28张在限度范围外。

3 结果

3.1 93批样品近红外光谱聚类分析的结果反映了与药物直接接触的包装材料上的差别。

第一类光谱图包含了H厂全部样品、S厂规格为2g和4g的样品及D厂规格为4g的样品, 均使用低硼硅玻璃管制瓶盛装;另一类图谱中包含了S厂规格为1g的样品及D厂规格为1g和2g的样品, 均采用钠钙玻璃模制瓶盛装。

3.2 通过建立三家生产企业产品的一致性检验模型, 可以很好的区分不同生产厂家的产品。

其中D厂的产品在选定波段内各批次产品的分布区间相对较集中。

4 结论

本文建立的注射用磷霉素钠近红外光谱聚类分析模型, 可以有效地区分与药物直接接触的包装材料的差别;一致性检验模型可以对不同生产厂家的产品进行很好的区分。

参考文献

[1]王晋, 张汝华, 马成禹.近红外光谱法在药学上的应用[J].中国医药工业杂志, 1999, 30 (1) :39-43.