二氢杨梅素论文 篇1
1药理作用
1.1抗炎、镇痛
藤茶有消炎,止咳,祛痰,镇痛等作用。实验研究表明, 杨萍等[4]用藤茶提取液能抑制甲醛性,角叉菜胶性小鼠足肿胀和能影响小鼠实验性结肠炎活动指数和病理学评分等。钟正贤等[5]用小鼠耳廓肿胀和小鼠扭体试验研究藤茶提取物的消炎镇痛作用,结果表明其明显抑制小鼠耳廓肿胀,减少小鼠扭体次数,具有抗炎、镇痛作用。索朗等[6]对角叉菜导致的足肿胀小鼠以不同剂量藤茶提取物灌胃结果表明三剂量组对小鼠肿胀具有显著抑制作用,大剂量组更明显。对由2% 巴豆油致小鼠耳廓肿胀有显著抑制作用。
1.2抑菌作用
曾春晖等[7]研究了藤茶中提取的二氢杨梅素对金黄色葡萄球菌,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、乙型溶血性链球菌、福氏痢疾杆菌、白色葡萄球菌、奈氏菌、白色念珠菌、枯草杆菌具有抑制作用,与盐酸黄连素比较二氢杨梅素对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的作用优于盐酸黄连素。谢鹏等[8]通过体外抑菌试验表明0. 1% 以上浓度的二氢杨梅素对金黄色葡萄球菌,鸡白痢沙门氏菌、大肠杆菌具有抑制作用。0. 2% 的二氢杨梅素对大肠杆菌的抑制效果优于0. 075% 的土霉素的,对沙门氏菌的抑制效果与0. 075% 的土霉素相当。熊大胜等[9]通过体外抑菌试验表明显齿蛇葡萄嫩茎叶中有效成分二氢杨梅素对金黄葡萄球茵、枯草杆菌均有很强的抑制作用,对黑曲霉、黄曲霉、青霉、交链霉均有不同程度的抑制效果。对黑曲霉、黄曲霉最低抑茵浓度分别是0. 7% , 1. 1% ,对金黄色葡 萄球菌、 枯草杆菌 最低抑菌 浓度小于0. 07% 。
1.3抗氧化作用
何桂霞等[10]研究了藤茶中总黄酮( 主要是二氢杨梅素) 对以黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶诱导产生的超氧离子自由基的清除作用,以及对以Vc - Fe系统诱导诱导大鼠肝匀浆及肝线粒体的抗氧化作用。研究表明TCF对氧自由基有清除作用. 并能预防性对抗超氧阴离子自由基引起的氧化性损伤。徐静娟等[11]通过氮蓝四唑光化还原法、抗坏血酸 - Cu2 +- H2O2体系法和亚油酸体系法,研究了二氢杨梅素对脂过氧自由基ROOO·、羟自由基·OH和超氧自 由基O2的清除作 用,分别为63. 9% 、 83. 9% 和90. 0% 。表明二氢杨梅素具有较强的抗氧化能力。王丹等[12]采用热水浸提 - 丙酮纯化法从藤茶中提取二氢杨梅素, 再对二氢杨梅素对大鼠体内外抗氧化活性进行检测。结果藤茶中提取二氢杨梅素具有较高的抗氧化活性。
1.4降血脂、血糖作用
陈玉琼等[13]用高脂饲料建大鼠高脂血症模型,以不同剂量的黄酮和二氢杨梅素灌胃,结果表明其具有显著降低小鼠血清TC、TG、LDL含量,升高血清中HDL - C的含量作用。说明藤茶的二氢杨梅素能降低小鼠血脂,争强机体抗氧化能力,减轻高脂肪对干细胞的损伤作用。郑成等[14]以D - 半乳糖为诱导剂,采用剂量递增全程腹腔注射法建立糖耐量异常动物模型, 实验8周,测定各实验组大鼠空腔及餐后2 h血糖、胰岛素水平,结果表明对照组比正常组增高明显,胰岛素水平和抗性明显增加。不同剂量的干预组42 h后,餐后血糖和胰岛素抗性明显降低。表明二氢杨梅素对血糖有明显改善作用。钟正贤等[15]以四氧嘧啶建立糖尿病模型、肾上腺素和葡萄糖引起的高血糖小鼠模型,研究了藤茶中总黄酮( 主要是二氢杨梅素) 降血糖作用。结果表明二氢杨梅素对四氧嘧啶所致糖尿病小鼠有较好的治疗作用,对肾上腺素、葡萄糖引起的高血糖小鼠也有明显的降血糖作用。
1.5保肝护肝作用
研究表明,二氢杨梅素在保肝护肝的作用机理已基本明确,主要是通过抑制肝M细胞胶原纤维的形成,从而达到治疗目的[16,17]。藤茶提取物二氢杨梅素能够显著降低肝纤维化大鼠血清中丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、碱性磷酸酶和球蛋白的含量,差异极显著。以及肝组织中丙二醛和肝组织羟脯氨酸含量差异显著,明显提高白蛋白和肝组织谷胱甘肽过氧化物酶活性。肝组织切片表明二氢杨梅素明显改善肝组织病理损伤程度。二氢杨梅素具有保护肝细胞,抗肝纤维化,减少肝损伤的作用[18]。王俊杰等[19]用复方高脂饮食建立非酒精性脂肪肝小鼠模型,用藤茶治疗42天后小鼠血清中TC、TG、ALT、 AST水平,以及肝脏TC、TG含量均显著降低比模型组,病理切片显示藤茶治疗组小鼠肝脂肪变性程度较模型组显著减轻。
1.6抗肿瘤作用
藤茶提取物( 二氢杨梅素) ,体内有肿瘤抑制作用; 在体内实验中,二氢杨梅素在一定的剂量作用下对S180瘤株有明显的抑制作用,对H22瘤株小鼠的生命延长率达到30% 以上。表明二氢杨梅素有良好的抗肿瘤活性[20]。郑作文等[21]采用MTT法、生长曲线法、细胞集落形成法研究二氢杨梅素对人胃癌SGC - 7901细胞的抑制作用。结果表明二氢杨梅素对人胃癌SGC - 7901细胞的增殖有明显抑制作用。周春权等[22]应用四甲基偶氮唑蓝( MTT) 法研究藤茶提取物对肿瘤细胞体外增殖的影响。结果表明: 藤茶提取物在体内对S180的生长有一定的抑制作用,在体外对人乳腺癌和人前列腺癌有明显的抑制作用。
1.7其他作用
此外二氢杨梅素还能够有效阻止因酒精导致的肝脏还原型谷胱甘肽耗竭和丙二醛升高,降低甘油三酯含量,减轻肝细胞脂肪变性程度,具有较好的预防和治疗酒精性肝损伤效果[23]。 潘人琦等[24]采用53 ℃ 林城老酒一次性灌胃法建立小鼠醉酒模型,以研究二氢杨梅素解酒作用。结果表明: 二氢杨梅素预防给药可以明显延长小鼠翻正反射消失时间,显著缩短维持时间; 醉酒小鼠给予二氢杨梅素后,显著缩短了醒酒时间,说明二氢杨梅素具有一定的防醉解酒作用。闫猛等[25]研究了藤茶中二氢杨梅素对预防大鼠肾结石的作用机制。结果表明: 二氢杨梅素能够降低大鼠血清BUN、Cr和尿中Ca、UA含量,增加肾组织SOD活性,降低MDA含量。肾组织切片显示,二氢杨梅素组草酸钙结晶明显减少,管腔扩张减小,说明二氢杨梅素对大鼠肾结石有一定的防治作用。
2展望
研究表明: 藤茶中二氢杨梅素具有显著的抗炎、保肝、抗癌等多方面作用,但主要药效学基础尚不清楚,作用机理还不十分明确。我国的藤茶资源丰富、来源广泛,具有很高的开发利用价值。据现有的研究表明,二氢杨梅素具有多种生物活性,具有很高的开发利用价值。
摘要：藤茶是我国民间饮用较广的一种保健茶,因其具有重要的生理保健功能而广受欢迎。藤茶中含有较多的黄酮类化合物,其中主要的活性成分是二氢杨梅素,且含量最高。据报道,二氢杨梅素具有抗氧化、消炎、止咳、降脂、保肝护肝等作用,在食品工业和制药工业应用非常广泛。本文介绍藤茶中二氢杨梅素近年来的药理作用的研究状况,为藤茶的开发利用提供理论依据。
二氢杨梅素论文 篇2
关键词：藤茶；最佳采摘期；超声波-乙醇法；二氢杨梅素（DMY）；RP-HPLC
中图分类号： R284.1；O657.7+2 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2014）07-0332-03
收稿日期：2013-09-15
基金项目：湖南省科技计划（编号：2013FJ6090）；湖南省高校科技创新团队支持计划（编号：2010212）；湖南省“十二五”植物学重点建设学科项目（编号：201142）。
作者简介：付明（1966—），女，湖北荆门人，副教授，主要从事植物生物化学研究。E-mail：fm6988@163.com。藤茶别称显齿蛇葡萄（Ampelopsis grossedentata），属葡萄科蛇葡萄属。湘西少数民族将其制成保健茶，长年饮用可强身健体，还可治疗感冒、咽喉肿痛、黄疸型肝炎等症[1]。藤茶有抗氧化作用[2-3]，含有大量黄酮类物质，其中主要是二氢杨梅素（dihydromyricetin，DMY）。有研究表明，藤茶叶中总黄酮含量达45%[4-5]，DMY含量达16.32%～33.03%[6]，这是非常罕见的，吸引了许多学者开展相关研究。黄酮物质可抑制脂质过氧化[7]、抑菌[8]、降血压、降血糖[9-10]、减轻肝细胞变性和肿胀[11]、增强单核巨噬细胞吞噬功能和溶血功能、抗肿瘤、祛痰止咳等。随着研究的深入，DMY降血糖、抗氧化、抑菌、抗肿瘤等活性成为研究热点。本研究以湘西藤茶为原料，从索氏提取法、乙醇浸提法、超声波-乙醇法中选择DMY提取率最高的方法提取样品DMY，再用反相高效液相色谱（RP-HPLC）法对不同时期、不同部位DMY含量进行测定，确定湘西藤茶的最佳采摘时期，为其合理开发提供理论依据。
1材料与方法
1.1材料与仪器
藤茶采自湖南省怀化市。DMY对照品（纯度99%，湖南省张家界至诚生物有限公司）；甲醇、磷酸（天津市科密欧化学试剂有限公司），均为色谱纯。
Waters 1525高效液相色谱仪（美国Waters公司）；JY98-IIDN 智能型超声波细胞粉碎机（浙江省宁波新芝生物科技股份有限公司）；FW177型中草药粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）。
1.2方法
1.2.1样品溶液的制备将材料洗净、切段、干燥后粉碎并过60目筛，密封保存。
索氏提取法：取样品2.0 g置于索氏提取器中，回流提取8 h，收集滤液，旋转蒸发浓缩后用65%乙醇定容至100 mL。取150 μL稀释后用0.45 μm滤膜过滤制成相当于原料 0.3 mg/mL 的样品液1。
乙醇浸提法：取样品2.0 g置于三角瓶中，加入65%乙醇，65 ℃下振荡提取24 h，5 000 r/min离心，收集滤液，用65%乙醇定容至100 mL。同上处理得样品液2。
超声波-乙醇提取法：取样品2.0 g加入40 mL 65%乙醇，于65 ℃温水中浸提2 h；用超声波处理20 min，离心；滤渣再用40 mL 65%乙醇超声25 min，离心；合并滤液，用65%乙醇定容至100 mL。同上处理得样品液3。
1.2.2色谱条件的选择选择色谱柱系Sino chrom C18柱（4.6 mm×150 mm，5 μm）；流速1.0 mL/min；进样体积 20 μL；柱温31 ℃；流动相为甲醇-水，分别用磷酸、磷酸二氢钠调节pH值，以不同的比例分别在294、310 nm波长处进样，根据峰形确定最佳的色谱条件。
1.2.3标准曲线及线性关系考察取干燥后的DMY粉末0.010 6 g，用甲醇溶解、定容至10 mL，配成1.06 mg/mL的DMY对照品液。分别取DMY对照品溶液0.1、0.4、0.7、1.0、1.3、1.6、1.9 mL于25 mL容量瓶中，用甲醇定容，配制成不同浓度的对照品溶液。吸取各浓度对照品溶液20 μL，注入色谱仪，按确定的色谱条件测峰面积，以峰面积对DMY浓度绘制标准曲线。
2结果与分析
2.1色谱条件的确定
当采用甲醇-水为流动相时，出现拖尾；加入磷酸二氢钠时，拖尾现象稍有改善但分离效果不太好；加入磷酸时，消除了拖尾现象，峰形对称，分离效果好。将甲醇-0.1%磷酸按（20～80） ∶（20～80）進样，当甲醇、0.1%磷酸体积比27 ∶73时，对照品和样品的各组分达到了良好的分离，且保留时间适中。当检测波长为294 nm时，DMY的峰无杂质干扰。因此，确定最佳色谱条件为Sino chrom C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），柱温31 ℃，检测波长294 nm；流动相为甲醇-0.1%磷酸（27 ∶73），流速1.0 mL/min；进样体积 20 μL。按照该色谱条件将对照品和样品液分别进样，RP-HPLC 图谱分别见图1、图2，DMY保留时间约为 7.5 min。
2.2标准曲线及回归方程的建立
以峰面积对对照品浓度绘制标准曲线，得回归方程y=60 055.848 5x-73 641.974 2，r=0.999 2，说明在4.24～8056 g/mL范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系。
藤茶二氢杨梅素的提取新工艺研究 篇3
藤茶二氢杨梅素的提取新工艺研究
以MARS5微波装置和压力蒸气灭菌器为提取装置,稀碱水为溶剂,用吸光度法为测定方法.对料液比、微波温度、微波时间、微波功率、转子转速和高温高压时间的.6个因素作了单因素实验和正交实验,考察了对二氢杨梅素提取率的影响,而且通过正交实验,确定最佳提取条件为高温高压时间45min,料液比1∶25,微波温度95℃,微波时间5min,微波功率600W,转子高速.
作 者：韦星船 郑成 许永炬 WEI Xing-chuan ZHENG Cheng XU Yong-ju 作者单位：广州大学化学化工学院,广州,510006 刊 名：食品科技 PKU英文刊名：FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 年，卷(期)： 32(9) 分类号：Q946.841 TS202.3 关键词：藤茶 二氢杨梅素 微波 高温高压